酶固定化後,性質會發生哪些改變,其原因是什麼

2021-03-03 21:56:12 字數 1874 閱讀 9445

1樓:匿名使用者

固定化對酶活性的影響: 固定化以後,酶活性下降,反映速率下降。

酶固定化後,性質會發生哪些改變,其原因是什麼

2樓:匿名使用者

固定化酶(immobilized enzyme)是20世紀60年代發展起來的一種新技術。所謂固定化酶,是指在一定

內的空間範圍內起催容化作用,並能反覆和連續使用的酶。通常酶催化反應都是在水溶液中進行的,而固定化酶是將水溶性酶用物理或化學方法處理,使之成為不溶於水的,但仍具有酶活性的狀態。

戊二醛交聯法對固定化細胞酶活穩定性的影響

用4%的海藻酸鈉包埋5%的大腸桿菌細胞菌懸液,觀察在惡劣環境中儲存後的固定化細胞酶活力損失情況,將用戊二醛交聯的固定化細胞作為對比進行試驗,得出戊二醛交聯法對固定化細胞酶活穩定性的影響。結果如圖1,由圖可知,經戊二醛交聯過的固定化細胞在惡劣環境中儲存後,酶活力損失率較大,酶活穩定性明顯下降。

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3樓:淵源

一、包埋法

定義:將酶、細胞或原生質體包埋在各種多孔載體中,使其固定化的方法。

分類:根據載體的材料和方法的不同分為凝膠包埋法(網格型包埋法)、半透膜包埋法(微囊型包埋法)。

1、凝膠包埋法:應用最廣泛的固定化方法。

定義:以各種多孔凝膠為載體,將酶、細胞或原生質體包埋在凝膠的微孔內的固定化方法。

載體:瓊脂凝膠、海藻酸鈣凝膠、角叉菜膠、明膠、聚丙烯醯胺凝膠等。

注意事項:凝膠的孔徑應控制在小於酶分子直徑的範圍內;不適於那些底物或產物分子很大的酶類的固定化。

2、半透膜包埋法

定義:將酶或細胞包埋在由各種高分子聚合物製成的小球內,製成固定化酶或固定化細胞。

載體:聚醯胺膜、火棉膠膜等。 適用:底物和產物都是小分子物質的酶的固定化。

方法:將酶液滴分散在與水互不相溶的有機溶劑中,在酶液滴表面形成半透膜,將酶包埋在微膠囊中。

二、結合法

定義:選擇適宜的載體,使之通過共價鍵或離子鍵與酶結合在一起的固定化方法。

分類:根據酶與載體結合的化學鍵不同分為離子鍵結合法、共價鍵結合法。

1、離子鍵結合法

定義:通過離子鍵使酶與載體結合的固定化方法。

載體:某些不溶於水的離子交換劑,如deae-纖維素、deae-葡聚糖凝膠。

方法:一定條件下,酶與載體混合攪拌幾小時,或是將酶液緩緩流過處理好的離子交換柱。

特點:結合力較弱,在ph、離子強度等條件改變時,酶容易脫落。

使用注意:ph、離子強度、溫度等的控制。

2、共價鍵結合法

定義:通過共價鍵將酶與載體結合的固定化方法。

常用載體:纖維素、葡聚糖凝膠、瓊脂糖凝膠等

可以形成共價鍵的基團:氨基、羧基、巰基、羥基、酚基和咪唑基等。

特點:結合牢固、酶不會脫落、可連續使用較長時間;載體活化的操作複雜;共價結合可能影響酶的空間結構,從而影響酶的催化活性。

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4樓:彼岸的暗夜

固定化酶(immobilized enzyme)是20世紀60年代發展起來的一種新技術。所謂固定化酶,是指在一定的空間範圍內起催化作用,並能反覆和連續使用的酶。通常酶催化反應都是在水溶液中進行的,而固定化酶是將水溶性酶用物理或化學方法處理,使之成為不溶於水的,但仍具有酶活性的狀態。

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5樓:匿名使用者

例如結合法中的共價鍵結合法,使結合很牢固,不會脫落,可以連續使用較長時間,但載體活化的操作複雜,比較麻煩,同時由於共價結合時可能影響酶的空間構象而影響酶的活性。

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