pcr與dna分子克隆PCR與DNA分子克隆

2021-03-06 04:57:50 字數 1421 閱讀 1105

1樓:百優生物

這個有多方面的原理:

一個:pcr有錯誤,雖然這個錯誤率很低,普通的酶大概在千分之一,而高保真的在百萬分之一,但畢竟有。

二個:基因儲存的問題:pcr產物當然也可以儲存,但儲存時間長了會不會出問題?

能儲存幾年?克隆進質粒就不一樣了,這個基本可以儲存很久,哪一天想要這個基因,拿出來搖一小瓶就可以了。

三個:單克隆性,pcr片斷可能有長有短(還有突變),而質粒就不一樣了,可以挑單克隆,測序正確後就認為這是我們想要的基因。

四個:做基因表達時連線方便。如果pcr產品上沒有酶切位點,克隆載體上有,切下來可以連到表達載體上。

象有些人做基因庫時,都是克隆到載體上,肯定是這樣有很多優點的。

2樓:匿名使用者

轉化質粒不止是為了擴增,

如果是表達宿主,可以重組表達蛋白質

或者質粒改變或增加了宿主的抗性

就測序的話,sanger法前幾十個bp的訊號不是很穩定,所以在質粒載體上,可以用通用引物承擔這部分弱訊號

如果是混合模板比如微生物群落,pcr產物就是混合物,需要做文庫挑單克隆

pcr和dna體內複製的區別是什麼

3樓:匿名使用者

您好,給您解釋下這個問題。

這個問題涉及到必修有關內容,具體解析如下:

本質上是一樣的,都是在dna聚合酶的作用下進行的複製。

但是pcr將體內的反應加快了,體內的反應是受生命過程控制的,而pcr反應是靠溫度控制的。

另外,pcr擴增所需要的dna聚合酶之耐高溫的熱穩定dna聚合酶,同時需要引物。

滿意請採納。

4樓:姓從蓉祕素

相同點:都是半保留複製。

不同點:

1、酶不同,體內主要是dna聚合酶,體外是taq酶;

2、溫度不同,體內是37度,體外有變性、退火、延伸三種溫度;

3、解鏈方式不同,體內採用解旋酶同時消耗atp,體外採用熱變性;

4、體內的聚合酶有校對功能,體外的taq酶沒有校對功能;

5、體內所用引物是rna,體外一般是dna引物。

hbv-dna(pcr)陰性什麼意思

5樓:匿名使用者

意思是,乙肝病毒定量檢測結果:每毫升血液中病毒數量小於最小檢測值(通常是500個)。

陰性並不代表沒有乙肝,而是可能乙肝病毒數量極少。

dna分子克隆與pcr擴增dna的區別

6樓:匿名使用者

有以下優點:

1。可大批量

2。量/**比很高

3。方便下游的工作,比如連線,突變等等,好操作。

4。便於儲存序列。

5。質粒便於運輸。

pcr管與離心管

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