定量pcr中的Rn值指的是什麼啊

2021-03-06 23:07:08 字數 3157 閱讀 7684

1樓:團長是

δrn = r+n - r-n ,計算δrn ,其中, r+n 是表示每點測量的熒光強度, r-n 表示熒光基線強度

實時熒光定量pcr是利用熒光訊號的變化,實時檢測pcr擴增反應中每次迴圈擴增產物量的變化,通過迴圈閾值和標準曲線的分析對標本中起始模板拷貝數進行定量分析。

擴充套件資料:特點實時熒光定量pcr由於熒光物質的應用,可以通過光電傳導系統直接探測pcr擴增過程中熒光訊號的變化以獲得定量結果,克服了常規pcr的許多缺點,具有如下優勢:

①能對模板定量;

②封閉反應,無需pcr後處理,汙染少,假陽性率低;

③觀察和記錄自動化,結果直觀,避免人為判斷帶來的誤差;

④工作效率高,利於實現高通量檢測。

實時熒光定量pr的缺點表現:

①需要特殊裝置以及熒光探針,成本較高;

②不能顯示pcr產物的片段長度;

③定量準確性還有待提高。

2樓:藍色葡萄風信子

δrn 的值表示pcr過程中探針降解的量,就是pcr產物的量實時定量pcr的發明歸功於兩個重要的發現:

一是發現dna taq酶有5′ 3′外切酶活性二是利用熒光能量傳遞技術構建了雙標記寡核苷酸探針即taqman探針

在pcr過程中,這些熒光訊號可以被探測器所「即時」捕獲,電腦軟體可以通過等式

δrn = r+n - r-n 計算δrnr+n 是表示每點測量的熒光強度

r-n 表示熒光基線強度

做熒光定量pcr時,△△ct值是什麼意思,它的計算公式是什麼

3樓:北京索萊寶科技****

△△ct = △ct(試驗樣品) — △ct(基準樣品)△ct(試驗樣品) = ct(試驗樣品,目的基因) — ct(試驗樣品,內參基因)

△ct(基準樣品) = ct(基準樣品,目的基因) — ct(基準樣品,內參基因)

2 -△△ct =2 -(-1.2)= 2.30

請問:做熒光定量pcr時,△△ct值是什麼意思,它的計算公式是什麼? 20

4樓:禾鳥

△△ct是熒光定量計算公式的簡化形式,用於比較不同樣品之間的差別或變化比率。

ct=-1/lg(1+ex)*lgx₀+lgn/lg(1+ex),其中,n為擴增反應的迴圈次數,x₀為初始模板量,ex為擴增效率,n為熒光擴增訊號達到閾值強度時擴增產物的量。△ct(n)=ct(目的基因)-ct(內參基因);△△ct(n)=△ct(n)-△ct(1)。

起始拷貝數越多,ct值越小。利用已知起始拷貝數的標準品可作出標準曲線,其中橫座標代表起始拷貝數的對數,縱座標代ct值。因此,只要獲得未知樣品的ct值,即可從標準曲線上計算出該樣品的起始拷貝數。

擴充套件資料

熒光定量pcr的原理:

熒光定量pcr技術:在pcr反應體系中加入熒光基團,通過熒光訊號不斷累積而實現實時監測pcr全程,然後通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。在實時熒光定量pcr中,對全程pcr擴增過程進行實時檢測,根據反應時間和熒光訊號的變化可以繪製成一條曲線。

實時熒光定量常用的熒光化學分類有sybr green i法和tag man探針法。

ct值:c代表cycle,t代表threshold,ct值的含義是每個反應管內的熒光訊號到達設定的域值時所經歷的迴圈數。

5樓:一生一個乖雨飛

△△ct這是相對熒光定量的一個計算公式的簡化形式,用於比較不同樣品之間的差別或變化比率。

ct= -k lgx0+ b(線性方程)用這個方程可以通過ct值算出樣品的起始濃度

斜率=-1/lg(1+e)

擴增效率e=1, 斜率=-3.32

擴增效率範圍:90%-110%

斜率範圍:-3.1和-3.59之間

例如,想看a基因和b基因在某細胞系中表達量的差別,選取18s作為內參基因,就用a基因的ct值減去18s的ct值,得到△ct1,用b基因的ct值減去18s的ct值得到△ct2,然後用△ct1-△ct2=△△ct,而a,b基因的表達量差別為2(-δδct)次方。

當然這計算方法是基於熒光定量的數學計算模型簡化來的,平時使用沒什麼問題,如果兩個目的基因的擴增效率不一樣,這個計算方法是不能用的。

6樓:匿名使用者

ct= -k lgx0+ b(線性方程)用這個方程可以通過ct值算出樣品的起始濃度

斜率=-1/lg(1+e)

擴增效率e=1, 斜率=-3.32

擴增效率範圍:90%-110%

斜率範圍:-3.1和-3.59之間

△△ct這是相對熒光定量的一個計算公式的簡化形式,用於比較不同樣品之間的差別或變化比率

例如,想看a基因和b基因在某細胞系中表達量的差別,選取18s作為內參基因,就用a基因的ct值減去18s的ct值,得到△ct1,用b基因的ct值減去18s的ct值得到△ct2,然後用△ct1-△ct2=△△ct,而a,b基因的表達量差別為2(-δδct)次方,當然這中計算方法是基於熒光定量的數學計算模型簡化來的,平時隨便用用沒什麼問題,如果你的兩個目的基因的擴增效率不一樣,這個計算方法是不能用的。

7樓:匿名使用者

我這邊有關於△△ct法的相關文獻以及推導公式,方便的話可以給我留一下你的郵箱

滴定試驗中的f值指的是什麼

8樓:雯王

顯示引數估計的精準度,也是看他對應的p值或t值,一般小於0:

f值是檢驗線性關係,越小越好

a值你講的可能是截距吧迴歸分析中,一般越到越好p值是概率值.1均可

統計學中的power值是指什麼

9樓:匿名使用者

power是指power of test statistic,是

來統計量的「源統計檢驗bai力」。

統計檢驗能du力(power of a statistical test),1-β,是在零假設為假應該被拒絕的情zhi況下,假設檢驗拒dao絕的概率。與犯第二類錯誤的概率互補的部分,(1-β),稱為統計檢驗能力。[1]

在定量pcr中,常說的ntc是什麼意思啊

10樓:匿名使用者

no template control,即無模板對照,是陰性對照

求助關於熒光定量PCR的CT值問題

怎麼了,熒光訊號值達到設定閾值所需的迴圈數就是ct值 求助關於熒光定量pcr的ct值問題 如果有標準曲線,按照標準曲線計算。一般都是相對量。則用delta delta ct方法來計算。舉例如下 對照組基因a的ct值為20,內參 比如 actin ct值15。實驗組基因a ct值18,內參ct值14。...

求助關於熒光定量PCR的CT值問題

如果有標準曲線,按照標準曲線計算。一般都是相對量。則用delta delta ct方法來計算。舉例如下 對照組基因a的ct值為20,內參 比如 actin ct值15。實驗組基因a ct值18,內參ct值14。首先算加樣量 delta ct 15 14 1。2的1次方是2。也就是說實驗組的加樣量是對...

乙肝檢查化驗中的PCR定量檢測是用來幹嘛的

原理 採用熒光實時定量pcr的方法,將pcr的靈敏性和熒光探針雜交的特異性相結合,通過實時檢測技術連續不斷地檢測pcr擴增過程中的熒光訊號,利用熒光訊號到達設定的閾值時所經歷的迴圈數和原始模板數量完全成線性關係的原理,對血清中的hbv dna進行定量。作用 前進行病毒定量pcr檢測,可以判斷患者是否...