哪個實驗證明DNA的半保留複製怎樣用實驗原理來證明dna是半保留複製

2021-03-07 04:51:50 字數 5703 閱讀 1408

1樓:聽風

在上世紀中葉(1950s)james watson 和 francis crick提出了著名的dna雙螺旋以及雙鏈間鹼基配對的模型,根據這個模型,他們進一步提出了dna複製的半保留模型(semiconservative model),雖然這個模型比當時並存的全保留模型(conservative 模型)看起來簡單易行的多,但始終缺乏有說服力的資料. 最後在2023年,當時在caltech作研究生的matthew meselson和作博士後的franklin stahl設計並實現了這組著名的,證明了dna複製半保留機理的實驗.

試驗中,他們先將大腸桿菌細胞培養在用15nh4cl作為唯一氮源的培養液裡養很長時間(14代),使得細胞內所有的氮原子都以15n的形式存在(包括dna分子裡的氮原子).這時再加入大大過量的14nh4cl和各種14n的核苷酸分子,細菌從此開始攝入14n,因此所有既存的「老」dna分子部分都應該是15n標記的, 而新生的dna則應該是未標記的.接下來他們讓細胞們繼續高高興興地生長,而自己則在在不同時間提取出dna分子,利用cscl密度梯度離心分離,而當細胞**了一次的時候只有一個dna帶,這就否定了所謂的全保留機理,因為根據全保留機理,dna複製應該通過完全複製一個「老」dna雙鏈分子而生成一個全新的dna雙鏈分子,那麼當一次複製結束,應該一半dna分子是全新(雙鏈都完全只含14n), 另一半是「全老」(雙鏈都完全只含15n).

這樣一來應該在出現在離心管的不同位置,顯示出兩條黑帶.

通過與全14n和全15n的dna標樣在離心管中沉積的位置對比,一次複製(**)時的這根dna帶的密度應當介於兩者之間,也就是相當於一根鏈是14n,另一根鏈是15n.而經歷過大約兩次複製後的dna樣品(generation=1.9)在離心管中顯示出強度相同的兩條黑帶,一條的密度和generation=1時候的一樣,另一條則等同於完全是14n的dna.

這樣的結果跟半保留機理推測的結果完美吻合。

2樓:猶雪晴集果

人的細胞先在含氮15的培養基和普通培養基上擴增,得到含氮15的dna和不含氮15的氮14dna的兩種細胞

下一步是將含氮15dna的細胞取適量轉移至普通培養基,

經過一代後,用氯化銫密度梯度離心等數量的三種細胞(只經過氮十四培養的、只經過氮十五培養的和兩種都經歷的),因為同位素的密度不同,一半氮十五一半氮十四的dna分子會在氮十五和氮十四的dna分子之間出現一個新的區帶,

兩代後的細胞離心和一代的比較會發現含有兩種氮的雜合的dna並不會增加,而氮十四的會加倍,

這說明dna在複製時會分成兩部分分別構成子代dna的一半,這些dna在多代後仍然保持其完整性

或者用放射性同位素標記法~!

用dna中含有的p

,s等進行標記`

然後分析`

3樓:溥蕾嘉知

n14和n15所做的同位素示蹤技術。

怎樣用實驗原理來證明dna是半保留複製

4樓:春素小皙化妝品

在僅以15nh4c1為氮源的培養基裡,使大腸桿菌繁殖數代,將其dna用重同位素15n標記上,然後立即將大腸桿菌轉移到14nh4c1培養基中繼續培養,按不同時間取樣品抽提dna,採用氯化銫密度梯度離心法分析。

結果表明dna分子在0代顯示重密度(hh),1代全部為中等密度(hl),2代表現為中等密度(hl)與輕密度(ll)等量。這樣,華森-克里克(watson-crick)的半保守複製模型首先在大腸桿菌得到了分子水平的證明。

擴充套件資料

dna複製為一個邊解旋邊複製的過程。複製開始時,dna分子首先利用細胞提供的能量,在解旋酶的作用下,把兩條螺旋的雙鏈解開,這個過程叫做解旋。然後,以解開的每一段母鏈為模板,以周圍環境中游離的四種脫氧核苷酸為原料,按照鹼基互補配對原則,在有關酶的作用下,各自合成與母鏈互補的一段子鏈。

隨著解旋過程的進行,新合成的子鏈也不斷地延伸,同時,每條子鏈與其對應的母鏈盤繞成雙螺旋結構,從而各形成一個新的dna分子。這樣,複製結束後,一個dna分子就形成了兩個完全相同的dna分子。新複製出的兩個子代dna分子,通過細胞**分配到子細胞中去。

新合成的每個dna分子中,都保留了原來dna分子中的一條鏈。

5樓:匿名使用者

人的細胞先在含氮15的培養基和普通培養基上擴增,得到含氮15的dna和不含氮15的氮14dna的兩種細胞

下一步是將含氮15dna的細胞取適量轉移至普通培養基,

經過一代後,用氯化銫密度梯度離心等數量的三種細胞(只經過氮十四培養的、只經過氮十五培養的和兩種都經歷的),因為同位素的密度不同,一半氮十五一半氮十四的dna分子會在氮十五和氮十四的dna分子之間出現一個新的區帶,

兩代後的細胞離心和一代的比較會發現含有兩種氮的雜合的dna並不會增加,而氮十四的會加倍,

這說明dna在複製時會分成兩部分分別構成子代dna的一半,這些dna在多代後仍然保持其完整性

或者用放射性同位素標記法~!

用dna中含有的p ,s等進行標記`

然後分析`

6樓:倚樓丶丶聽風雨

dna半保留複製的實驗是如何做的

7樓:匿名使用者

密度梯度離心法,用氮十四和氮十五

哪個實驗證明dna的半保留複製?真核生物的 要詳細。

8樓:匿名使用者

用經過同位素標記的含n15的細菌培養在用n14標記的鹼酸中培養,檢測後代第一代中的雙鏈一條含n14一條含n15

9樓:匿名使用者

科學家運用同位素示蹤技術

證明dna半保留複製的那個實驗,**等,求懂的人幫幫忙

10樓:鋼牙妹小詹

這個是看出來的,15n的分子質量大在下層,14n在上層,但是如果兩個不同時存在,就不能辨別,因為不知道密度梯度離心的介質中的物質與15n/14n的密度關係,如果知道的話應該是可以的

證明dna是半保留複製的試驗

11樓:匿名使用者

用聚合酶鏈式反du應(zhipcr)

pcr是現今dna體外複製dao的有效方法,通過專控制迴圈數可控制dna複製的代數

具體流程為屬:1、94攝氏度變性(破碎細胞,dna解螺旋,並變性成單鏈,時間較長)

2、94攝氏度變性(時間短)

3、低溫退火(據引物等實際情況確定溫度)

4、中溫延伸(一般為72攝氏度,這就是細胞中的複製過程)5、繼續延伸(時間短),該步驟可有可無

6、保溫(12攝氏度),據具體情況可以刪掉該步驟以上是dna複製一代的程式,如果需要增加複製代數,則用pcr儀進行2-4步的迴圈即可

具體知識可查閱《分子克隆》《分子生物學》等書

12樓:free我是你浩哥

半保留複製:是dna複製的模式

13樓:匿名使用者

多代複製後,具有氮14/氮15的dna永遠只有一條帶

而具有氮14帶可以有多條,不影響得出結論

至於如何控制培養一代,噬菌體是有溶菌週期的,可以在他未釋放前劇烈**攪拌,把它的dna弄出來

證明dnabad半保留複製的實驗是哪個

14樓:愛我家菜菜

首先,以含有n15標記的nh4cl培養液來培養大腸桿菌,讓其繁殖幾代,再將其轉移到n14的普通培養液中回.然後在不同時刻收集答大腸桿菌並提取dna,再將dna進行密度梯度離心,記錄其位置.若離心後有三條帶(自上而下為n15,n15/n14,n14),則可證明其為半保留

某同學通過實驗驗證dna是半保留複製還是全保留複製

15樓:兄弟連教育北京總校

是這樣的,標記是用同位素標記的,由於同位素有放射性,所以很容易被檢測到。我們現在是已知半保留複製,而在當時只是一種猜想。用普通大腸桿菌啊無法檢測複製行為的,但是用標記鏈就清晰多了,1代以後標記鏈佔1/2,2代2/8,3代2/16...

以此類推,說明這兩條分開並且被保留,這樣就推翻了全保留複製、解體複製等幾種猜想了。

16樓:匿名使用者

在2023年代的時候,美國有兩個科學家用一中細菌做了實驗。

這種細菌的營養**(食物)是ammonium nitrate,它裡面就有n的成分。他們兩個人運用了同位素的原理:自然界中最常見的氮元素是氮-14但自然界中也有氮-15這種同位素,所以他們向細菌第一次放含有氮-15的ammonium nitrate,然後他會produce dna,細菌溶解在caesium chloride 溶液裡面,dna會在溶液的靠底部,然後我們再把這群細菌拿出來放到有氮十四的試管內,dna會分節,以此類推,後面產生的dna都會分開,這就證明了半保留複製

17樓:鬆玉蘭酒庚

人的細胞先在含氮15的培養基和普通培養基上擴增,得到含氮15的dna和不含氮15的氮14dna的兩種細胞

下一步是將含氮15dna的細胞取適量轉移至普通培養基,

經過一代後,用氯化銫密度梯度離心等數量的三種細胞(只經過氮十四培養的、只經過氮十五培養的和兩種都經歷的),因為同位素的密度不同,一半氮十五一半氮十四的dna分子會在氮十五和氮十四的dna分子之間出現一個新的區帶,

兩代後的細胞離心和一代的比較會發現含有兩種氮的雜合的dna並不會增加,而氮十四的會加倍,

這說明dna在複製時會分成兩部分分別構成子代dna的一半,這些dna在多代後仍然保持其完整性

怎樣證明dna分子是半保留複製的

18樓:淵源

在上世紀中葉(1950s)james watson 和 francis crick提出了著名的dna雙螺旋以及雙鏈間鹼基配對的模型,根據這個模型,他們進一步提出了dna複製的半保留模型(semiconservative model),雖然這個模型比當時並存的全保留模型(conservative 模型)看起來簡單易行的多,但始終缺乏有說服力的資料。 最後在2023年,當時在caltech作研究生的matthew meselson和作博士後的franklin stahl設計並實現了這組著名的,證明了dna複製半保留機理的實驗。

試驗中,他們先將大腸桿菌細胞培養在用15nh4cl作為唯一氮源的培養液裡養很長時間(14代),使得細胞內所有的氮原子都以15n的形式存在(包括dna分子裡的氮原子)。這時再加入大大過量的14nh4cl和各種14n的核苷酸分子,細菌從此開始攝入14n,因此所有既存的「老」dna分子部分都應該是15n標記的, 而新生的dna則應該是未標記的。接下來他們讓細胞們繼續高高興興地生長,而自己則在在不同時間提取出dna分子,利用cscl密度梯度離心分離,而當細胞**了一次的時候只有一個dna帶,這就否定了所謂的全保留機理,因為根據全保留機理,dna複製應該通過完全複製一個「老」dna雙鏈分子而生成一個全新的dna雙鏈分子,那麼當一次複製結束,應該一半dna分子是全新(雙鏈都完全只含14n), 另一半是「全老」(雙鏈都完全只含15n)。

這樣一來應該在出現在離心管的不同位置,顯示出兩條黑帶。

通過與全14n和全15n的dna標樣在離心管中沉積的位置對比,一次複製(**)時的這根dna帶的密度應當介於兩者之間,也就是相當於一根鏈是14n,另一根鏈是15n。而經歷過大約兩次複製後的dna樣品(generation=1.9)在離心管中顯示出強度相同的兩條黑帶,一條的密度和generation=1時候的一樣,另一條則等同於完全是14n的dna。

這樣的結果跟半保留機理推測的結果完美吻合

就這樣,關於dna複製機理的爭論終於被meselson和stahl完美解決,而基因學和基因組學也得以在此後的五十年取得一系列重大突破。

證明dnabad半保留複製的實驗是哪個

首先,以含有n15標記的nh4cl培養液來培養大腸桿菌,讓其繁殖幾代,再將其轉移到n14的普通培養液中回.然後在不同時刻收集答大腸桿菌並提取dna,再將dna進行密度梯度離心,記錄其位置.若離心後有三條帶 自上而下為n15,n15 n14,n14 則可證明其為半保留 大學理工類都有什麼專業 10 理...

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