如何用流式細胞儀檢測轉染細胞的效率

2021-05-19 16:52:34 字數 703 閱讀 7325

1樓:匿名使用者

陰性對照源最好用轉染無gfp載體的bai

細胞,因為轉染可能du會改變細胞的zhi自發熒光本地確保陰dao性對照和實驗細胞的濃度相同,具體多少倒是無所謂,不要太稀釋就好

上機前,用細胞濾網過濾掉大塊未消化的雜質

不要固定,gfp固定後熒光強度會下降。

請教用流式細胞儀檢測細胞轉染效率的步驟

2樓:顛覆天下巨蟹

個不是絕對的。bai

如果實驗條件固定,一du小時zhi就可以做240個樣本了。算15秒一個dao的話,版樣本濃度滿足條件,樣本染色權處理的時間不算在內。幾秒鐘就可以記錄一個樣本。加上自動加樣機。

當然,根據樣本的濃度和所要求記錄的量而定

如何用流式細胞儀檢測細胞內的ros

3樓:匿名使用者

流式檢測ros的特異性比較差。一般來說,針對過氧化氫和超氧化物有熒光探針。加到細胞培養液後,細胞攝齲遇到ros,可以發出熒光,上機檢測可以比較各組之間熒光強度的變化從而代表ros水平的不同。

你這個圖橫座標代表的是相對熒光強度,縱座標代表的是細胞計數。 圖的含義就是在每個熒光強度有多少細胞。 估計你用了氧化敏感的熒光指標,ros反應後熒光增加。

所以你應該先用對照組設一個閾值,看實驗組的熒光強度有沒有高於或者低於該閾值。

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