如何區分共振能量轉移和靜態複合物形成引起的熒光強度下降

2021-03-21 23:55:21 字數 1926 閱讀 8499

1樓:匿名使用者

標準曲線按照標準曲線計算

般都相量則用delta delta ct計算舉例: 照組基act值20 內參

(比βactin)ct值15實驗組基a ct值18內參ct值14 首先算加量:delta ct=15-14=1212說

建議查下資料

感覺問題主意不是很清晰

熒光共振能量轉移 lifetime為什麼下降

2樓:

如果有標準曲線,按照標準曲線計算。

一般都是相對量。則用delta delta ct方法來計算。舉例如下:

對照組基因a的ct值為20, 內參(比如βactin)ct值15。實驗組基因a ct值18,內參ct值14。 首先算加樣量:

delta ct=15-14=1。2的1次方是2。也就是說。

熒光共振能量轉移熒光壽命有變化嗎

3樓:雙重韻達

能量供給體-接受體(d–a)對之間發生有效能量轉移的條件是苛刻的,主要包括:(1)能量供體的發射光譜與能量受體的吸收光譜必須重疊;(2)能量供體與能量受體的熒光生色團必須以適當的方式排列;(3)能量供體、能量受體之間必須足夠接近,這樣發生。

4樓:釗悟泥迎波

熒光壽命與具體的發光物質的物理和化學環境相關,一般用於定量觀測熒光團等微環境參量或者區別光譜重疊的熒光團,理論上與激發波長無關,但可能受制於實際的測量條件,結果會有區別。

請教關於熒光共振能量轉移(fret)中的標記方法有哪些?請不要給我講fret技術。

5樓:五杉居士

用過cisbio公司的transcreener/kinease/camp試劑盒沒?

kinease屬於直接法,用稀有金屬eu標記抗體 抗體與底物磷酸化位點結合 eu與xl665之間內

發生fret 檢測容兩個波長的熒光值再進行分析transcreener adp和camp屬於間接法(競爭法),抗體可以與adp/camp結合,也可以與adp-d2/camp-d2結合,兩者形成競爭關係。eu與d2之間發生fret,檢測雙波長熒光值進行分析。

類似的還有lance試劑盒

鐳射共聚焦顯微鏡能作熒光共振能量轉移嗎

6樓:扶桑樹

熒光能量共振轉移是距離很近的兩個熒光分子間產生的一種能量轉移現象。當供體熒光分子的發射光譜與受體熒光分子的吸收光譜重疊,並且兩個分子的距離在10nm範圍以內時,就會發生一種非放射性的能量轉移,即fret現象,使得供體的熒光強度比它單獨存在時要低的多(熒光猝滅),而受體發射的熒光卻大大增強(敏化熒光)。

熒光共振能量轉移技術的介紹

7樓:ˇ偏偏懷念

熒光能量共振轉移(fluorescence resonance energy transfer, fret)是較早發展起來的一門技術,隨著綠色熒光蛋白應用技術的發展,fret已經成為檢測活體中生物大分子奈米級距離和奈米級距離變化的有力工具,在生物大分子相互作用分析、細胞生理研究、免疫分析等方面有著廣泛的應用。

8樓:敬玉蓉褚卯

當一個熒光分子(又稱為供

體分子)的熒光光譜與另一個熒光分子(又稱為受體分子)的激發光譜相重疊時,

供體熒光分子的激發能誘發受體分子發出熒光,同時供體熒光分子自身的熒光強度衰減。fret程度與供、受體分子的空間距離緊密相關,

一般為7~10

nm時即可發生fret;

隨著距離延長,

fret呈顯著減弱。

供體和受體之間fret的效率,可以由e=1/1+(r/r0)exp6反映,其中r表示供體和受體之間的距離,r0表示福氏半徑,依賴供體發射譜和受體激發譜的重疊程度,以及供體和受體能量轉移的偶極子的相對方位。

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