感受態細胞放了小時多才轉化,會對結果有影響嗎

2021-04-18 20:08:19 字數 1134 閱讀 3607

1樓:阿魯巴星人

放在4℃冰箱內,問題不大

如果放在室溫下,那麼轉質粒(10kb以下)關係也不大,轉連線產物就有點不太好,因為感受態的效價至少下降兩個數量級左右

感受態細胞為什麼要放倒-80度儲存

2樓:匿名使用者

康體生命的感受態細胞都是-80度儲存的,dh5α,dh10β,stbl3,jm109,bl21(de3),top10這些都是包乾冰、包運送的,平均下來一支只要3.5

經轉化的感受態細胞,塗完板後,還有剩餘的菌液,為什麼是放在-4度儲存,為什麼不能放在-20度??

3樓:匿名使用者

是4度吧。。放4度是抑制其生長。。若放在-20度,雖然經過轉化後復甦,細胞是有些恢復了活性,但是畢竟還是很脆弱,-20度冷凍細胞,然後再解凍使用的話,很容易使細胞死亡的,加之如果本來細胞的轉化效率就不是很高的話,可能再次塗板的結果是沒有菌落長出。。。

一般,我們做實驗,剩餘對的菌液是不會再用的,一是不靠譜,二是若是塗的板沒長單菌落的話,那麼這個剩餘的菌液也就沒什麼作用了:若是長出了,大可以抽提質粒,下次用時再轉,或者搖菌後用甘油保種,下次用時可選擇劃線,也可以直接搖菌。。。

個人感覺那個剩餘的菌液,不存也罷。。不知道你那邊存起來時為了???

4樓:匿名使用者

為什麼要儲存?都塗上不就完了,如果轉化率較高,不必用離心,吸取200微升塗上就行了,轉化率低的時候離一下心倒掉上清留一兩百微升塗板。一般4度短時間儲存,-20度長期儲存。

菌液反覆凍融會影響菌種活力。如果一兩天內就要用還是放4度好。

做好的感受態細胞在-80度能儲存多久呢?

5樓:春野櫻

一般的細胞-80儲存2-3個月,最後不要超過2個月。

6樓:不流淚的兵

hen nan hui da

製備化轉感受態細胞od低於0.3會影響轉化效率麼 40

7樓:阿魯巴星人

當然會。

低於0.3細菌都沒正式進入對數期,細菌狀態不好,且菌量少,轉化效率基本上不會高。

轉化感受態細胞的目的是什麼轉化感受態細胞的前因後果

感受態細胞指的是經處理後,處於能吸收周圍環境中dna分子生理狀態的微生物細胞,在轉基因技術操作過程中要將重組dna分子匯入微生物受體細胞時就需要用感受態細胞。所謂轉化是目的基因進入受體細胞並在受體細胞中維持穩定和表達的過程。1 質粒dna的質量和濃度,環狀重組質粒的轉化率較分子量相同的線性重組質粒高...

大腸桿菌感受態細胞轉化實驗正負對照

轉化a.將 70 0c下保bai存的感受態細胞 du200 l 室溫下 zhi解凍後放置於冰上。dao b.將nd pucm t質粒dna溶液 不超過50ng 或回pcr產物與pucm t質粒的答連結產物,體積不超過10 l,輕輕搖勻,冰上放置30min。c.42 0c水浴中熱擊90s或370c水浴...

凍融法制備農桿菌感受態細胞,並且轉化質粒相關問題

實驗結果 不能肯定來的說明結果是成功源 的,做bai實驗的陰性對照也很du重要,陰性zhi對照必須做出陰性結果。如樓dao下的所說,可能是你的感受態菌被質粒汙染了。現在我回答一下你的 追問吧 未轉化質粒的感受態細胞在同樣的lb上塗板也長出單菌落 那麼這個長出的單菌落你有沒有做菌落pcr的鑑定?如果你...