微生物染色的微生物染色的基本原理

2021-09-11 12:51:22 字數 2844 閱讀 6397

1樓:假面

微生物染色的基本原理,是藉助物理因素和化學因素的作用而進行的。物理因素如細胞及細胞物質對染料的毛細現象、滲透、吸附作用等。化學因素則是根據細胞物質和染料的不同性質而發生地各種化學反應。

酸性物質對於鹼性染料較易吸附,且吸附作用穩固;同樣,鹼性物質對酸性染料較易於吸附。如酸性物質細胞核對於鹼性染料就有化學親和力,易於吸附。要使酸性物質染上酸性材料,必須把它們的物理形式加以改變(如改變ph值),才利於吸附作用的發生。

相反,鹼性物質(如細胞質)通常僅能染上酸性染料,若把它們變為適宜的物理形式,也同樣能與鹼性染料發生吸附作用。

細菌的等電點較低,ph值大約在2—5之間,故在中性、鹼性或弱酸性溶液中,菌體蛋白質電離後帶陰電荷;而鹼性染料電離時染料離子帶陽電。因此,帶陰電的細菌常和帶陽電的鹼性染料進行結合。所以,在細菌學上常用鹼性染料進行染色。

2樓:小周高等教育**答疑

微生物染色的基本原理

微生物染色的基本原理,是藉助物理因素和化學因素的作用而進行的。物理因素如細胞及細胞物質對染料的毛細現象、滲透、吸附作用等。化學因素則是根據細胞物質和染料的不同性質而發生地各種化學反應。

酸性物質對於鹼性染料較易吸附,且吸附作用穩固;同樣,鹼性物質對酸性染料較易於吸附。如酸性物質細胞核對於鹼性染料就有化學親和力,易於吸附。但是,要使酸性物質染上酸性材料,必須把它們的物理形式加以改變(如改變ph值),才利於吸附作用的發生。

相反,鹼性物質(如細胞質)通常僅能染上酸性染料,若把它們變為適宜的物理形式,也同樣能與鹼性染料發生吸附作用。

細菌的等電點較低,ph值大約在2—5之間,故在中性、鹼性或弱酸性溶液中,菌體蛋白質電離後帶陰電荷;而鹼性染料電離時染料離子帶陽電。因此,帶陰電的細菌常和帶陽電的鹼性染料進行結合。所以,在細菌學上常用鹼性染料進行染色。

影響染色的因素

有菌體細胞的構造和其外膜的通透性,如細胞膜的通透性、膜孔的大小和細胞結構完整與否,在染色上都起一定作用。此外,培養基的組成、菌令、染色液中的電介質含量和ph、溫度、藥物的作用等,也都能影響細菌的染色。

染料的種類和選擇

染料分為天然染料和人工染料兩種。天然染料有胭脂蟲紅、地衣素、石蕊和蘇木素等,它們多從植物體中提取得到,其成分複雜,有些至今還未搞清楚。目前主要採用人工染料,也稱煤焦油染料,多從煤焦油中提取獲得,是苯的衍生物。

多數染料為帶色的有機酸或鹼類,難溶於水,而易溶於有機溶劑中。為使它們易溶於水,通常製成鹽類。

染料可按其電離後染料離子所帶電荷的性質,分為酸性染料、鹼性染料、中性(複合)染料和單純染料四大類。

酸性染料

這類染料電離後染料離子帶負電,如伊紅、剛果紅、藻紅、苯胺黑、苦味酸和酸性復紅等,可與鹼性物質結合成鹽。當培養基因糖類分解產酸使ph值下降時,細菌所帶的正電荷增加,這時選擇酸性染料,易被染色。

鹼性染料

這類染料電離後染料離子帶正電,可與酸性物質結合成鹽。微生物實驗室一般常用的鹼性染料有美蘭、甲基紫、結晶紫、鹼性復紅、中性紅、孔雀綠和蕃紅等,在一般的情況下,細菌易被鹼性染料染色。

中性(複合)染料

酸性染料與鹼性染料的結合物叫做中性(複合)染料,如瑞脫氏(wright)染料和基姆薩氏(gimsa)染料等,後者常用於細胞核的染色。

單純染料

這類染料的化學親和力低,不能和被染的物質生成鹽,其染色能力視其是否溶於被染物而定,因為它們大多數都屬於偶氮化合物,不溶於水,但溶於脂肪溶劑中,如紫丹類(sudanb)的染料。

3樓:漢家春社

藉助物理因素和化學因素的作用而進行的.

物理因素如細胞及細胞物質對染料的毛細現象、滲透、吸附作用等.

化學因素則是根據細胞物質和染料的不同性質而發生地各種化學反應.

酸性物質對於鹼性染料較易吸附,且吸附作用穩固;

同樣,鹼性物質對酸性染料較易於吸附.如酸性物質細胞核對於鹼性染料就有化學親和力,易於吸附.但是,要使酸性物質染上酸性材料,必須把它們的物理形式加以改變(如改變ph值),才利於吸附作用的發生.

相反,鹼性物質(如細胞質)通常僅能染上酸性染料,若把它們變為適宜的物理形式,也同樣能與鹼性染料發生吸附作用.

4樓:冼秀雋

你是指格蘭仕染色的話,其原理如下:

通過結晶紫初染和碘液媒染後,在細胞壁內形成了不溶於水的結晶紫與碘的複合物,革蘭氏陽性菌由於其細胞壁較厚、肽聚糖網層次較多且交聯緻密,故遇乙醇脫色處理時,因失水反而使網孔縮小,再加上它不含類脂,故乙醇處理不會出現縫隙,因此能把結晶紫與碘複合物牢牢留在壁內,使其仍呈紫色;而革蘭氏陰性菌因其細胞壁薄、外膜層類脂含量高、肽聚糖層薄且交聯度差,在遇脫色劑後,以類脂為主的外膜迅速溶解,薄而鬆散的肽聚糖網不能阻擋結晶紫與碘複合物的溶出,因此通過乙醇脫色後仍呈無色,再經沙黃等紅色染料復染,就使革蘭氏陰性菌呈紅色

微生物染色的染色方法

微生物染色的革蘭氏染色機制

5樓:匿名使用者

對細菌細胞壁的詳細分析,為解釋革蘭氏染色的機制提供了較充分的基礎。目前多用物理機制來解釋革蘭氏染色現象。革蘭氏染色結果的差異主要基於細菌細胞壁的構造和化學組分不同。

通過初染和媒染,在細菌細胞膜或原生質體上染上了不溶於水的結晶紫與碘的大分子複合物。g+ 細菌由於細胞壁較厚、肽聚糖含量較高和交聯緊密,故用乙醇洗脫時,肽聚糖層網孔會因脫水而明顯收縮,再加上的g+ 細菌細胞壁基本上不含類脂,故乙醇處理不能在壁上溶出縫隙,因此,結晶紫與碘複合物仍牢牢阻留在其細胞壁內,使其呈現藍紫色。g- 細菌因其細胞壁薄、肽聚糖含量低和交聯鬆散,故遇乙醇後,肽聚糖層網孔不易收縮,加上它的類脂含量高,所以當乙醇將類脂溶解後,在細胞壁上就會出現較大的縫,這樣結晶紫與碘的複合物就極易被溶出細胞壁。

因此,通過乙醇脫色,細胞又呈現無色。這時,再經番紅等紅色染料復染,就使g- 細菌獲得了新的顏色——紅色,而g+ 細菌則仍呈藍紫色(實為紫中帶紅)。?

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