柱色譜實驗時,為什麼洗脫速度不能太快也不能太慢

2021-05-12 21:18:40 字數 577 閱讀 3314

1樓:匿名使用者

太快不能很好的分離各組份,太慢浪費時間.

柱色譜流動相沖洗速度慢是怎麼回事

2樓:進圖2客廳

一般說的液相色譜柱多指的是反相色譜柱。反相色譜柱比如c18、c8、苯基柱等等。

這些柱子儲存在有機相中,比如甲醇、乙腈裡面比較好,所以封存的時候大多用甲醇或者乙腈。反相的流動相大多數都是緩衝鹽的溶液,而鹽溶液在純有機相中容易析晶,所以才會有一個10%的甲醇水(或乙腈水)作為緩衝。

所以每次使用的時候,柱子裡面是甲醇,然後先用1.0ml/min的流速沖洗30min的10%甲醇水,然後上流動相平衡,大約30min基線跑平了就可以進樣了。

使用結束之後同樣沖洗30min的10%甲醇水,把流動相里面的緩衝鹽沖洗掉,然後用甲醇沖洗30min封存。

這個30min是大約10倍的柱體積,針對的是比較常見的250mm*4.6mm內徑的柱子,如果你用的是短柱可以自己計算一下衝洗的時間。

如果你是正相,因為正相色譜的流動相里沒有無機鹽,所以拿過來就可以直接沖洗流動相進行平衡了。使用結束之後直接用規定的正相溶液封存就可以了。

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