限制酶和dna連線酶分別是在哪步驟使用的

1樓:硯水果凍

限制酶在剪下目的基因的時候使用

dna連線酶在重組基因載體的時候使用

dna連線酶,限制酶分別連線的是什麼化學鍵

2樓:鵝子野心

限制性核酸內切酶:剪下【雙鏈dna】內的磷酸二酯鍵

dna聚合酶:連線【脫氧核糖核苷酸】與【dna單鏈】之間的磷酸二酯鍵

dna連線酶:連線【dna單鏈】與【dna單鏈】之間的磷酸二酯鍵

3樓:匿名使用者

dna連線酶連線磷

bai酸二酯鍵。

脫氧du核苷zhi酸以及脫

氧核苷酸鏈,dao連線都是依靠回磷酸二酯鍵答的。所以dna聚合酶和dna連線酶連線的化學鍵相同,但是物件不同,一個是脫氧核苷酸單體,一個是dn**段。

限制酶實際上是切割化學鍵,不是連線。它切割dna(一般是dna)上的磷酸二酯鍵,相當於使得dna在切割的地方發生水解,從而能夠形成dn**段。

dna連線酶的種類及區別?限制酶和dna連線酶作用的化學鍵分別是什麼? 載體的條件是?(3點 )

4樓:舞漫花櫻

1.(1)e·coli dna連線酶來

,**於大源腸桿菌,可用於bai連線du粘性末端;zhi

(2)t4dna連線酶dao:**於t4噬菌體,可用於連線粘性末端和平末端,但連線效率低。

(3)熱穩定的dna連線酶(thermostablednaligase),是從嗜熱高溫放線菌(thermoactinomycesthermophilus)菌株中分離純化的,一種能夠在高溫下催化兩條寡核苷酸探針發生連線作用的一種核酸酶。

2.dna連線酶:連線dna單鏈與dna單鏈之間的磷酸二酯鍵

限制性核酸內切酶:剪下雙鏈dna內的磷酸二酯鍵

3.作為運載體必須具有三個條件:

1在宿主細胞中能儲存下來並能大量複製;

2有多個限制酶切點,而且每種酶的切點最好只有一個,如大腸桿菌pbr322就有多種限制酶的單一識別位點,可適於多種限制酶切割的dna插入;

3有一定的標記基因,便於進行篩選。如大腸桿菌的pbr322質粒攜帶氨苄青黴素抗性基因和四環素抗性基因,就可以作為篩選的標記基因。一般來說,天然運載體往往不能滿足上述要求,因此需要根據不同的目的和需要,對運載體進行人工改建。

現在所使用的質粒載體幾乎都是經過改建的。