1樓:匿名使用者
讀結果的時候方便
沒有標記,雖然有不同長度的片段,但肉眼又看不見,就算通過電泳或其它方法把各個片段分開後,可看不到
2樓:得意兒的一撥一
熒光的作用是用來讀結果的,不同的鹼基發出不同的熒光。
3樓:sky思淼
儀器撲捉的是熒光,沒有熒光怎麼讀出序列呢
sanger測序的原理
4樓:匿名使用者
sanger法是根據核苷來酸在某一固定的點開自始,隨機在某一個特定的鹼基
處終止,並且在每個鹼基後面進行熒游標記,產生以a、t、c、g結束的四組不同長度的一系列核苷酸,然後在尿素變性的page膠上電泳進行檢測,從而獲得可見的dna鹼基序列。
其實就是在四個不同的反應體系中加入不同的終止劑,讓dna互補鏈的合成分別隨機的停止在a、c、g、t處,然後去跑個高解析度的膠,跑的最遠的就是第一個鹼基,然後依次類推,分別可以讀出其鹼基的排序
sanger測序有什麼優缺點?
5樓:匿名使用者
優點:方法簡便,解析度高,測序片段長。
缺點:dna模板的組成或二級結構有時引起dna聚合酶不正常終止。
6樓:眸娃娃
最大優點在於讀取速度很高、高精確度,而且成本相對很低。富含g-c的區域也不會影響測序效果。
缺點;測序試劑昂貴、處理比較長的同聚物時也有自身的問題,例如很難以高的可信度將7個a和8個a區分開來[2]。
sanger 求蛋白質測序法的原理,越詳細越好!
7樓:量子天堂
sanger蛋白質測序復的策略:
制(1)測定蛋白質分子中多肽鏈的數目
(2)拆分蛋白質分子的多肽鏈
(3)斷開多肽鏈內的二硫橋
(4)分析每一多肽鏈的氨基酸組成
(5)鑑定多肽鏈的n-末端和c-末端殘基
(6)裂解多肽鏈成較小的片段
(7)測定各肽段的氨基酸序列(edman降解法)(8)重建完整多肽鏈的一級結構
(9)確定半胱氨酸殘基間形成的s-s交聯橋的位置
8樓:匿名使用者
烴基化反應
sanger反應( dnfb或 fdnb )sanger用來鑑定多肽蛋白質的n末端氨基酸。
詳細測序方法請參照王靜巖版生物化學,因為太多,不方便敲上去。
9樓:手機使用者
sanger 法是指 用二硝基氟bai苯du(dnfp)與多肽鏈上的 n端zhi 氨基酸
的氨基dao反應 生成
回dnp-氨基酸 在酸性條件答下水解 多肽鏈, dnp-氨基酸斷裂下來,其餘的是多肽鏈,然後通過紙層析dnp-氨基酸,確定是那種氨基酸.(當然某些氨基酸中的r基上氨基和羥基也可與 dnfp反應,但可通過有機溶劑除去).
ps 2023年 英國人sanger用測定了牛胰島素的氨基酸序列,聞名於世.
全基因組測序後為什麼還用sanger測序
10樓:匿名使用者
現在全基因組測序bai用du鳥槍法,把所
有dna打碎zhi成短片段,測出所有dao片段的序列再用回超級計算機進行答
拼接。你說的是老方法,先構建大的長片段文庫,這些長片段互相重疊,能涵蓋全部基因組,即所謂的骨架scaffold。然後在對文庫裡每一個克隆進行亞克隆,應該還進行亞亞克隆,得到可以直接測序的短片段克隆,即所謂的可以測序得到reads的克隆。
每個reads的序列拼接起來,逐級拼接,最後得出每一個長片段克隆的序列,最後進行長片段克隆的拼接,得到每一條染色體的序列。實際上老方法就是分級克隆,再拼接,鳥槍法就是直接得到短片段,不經過克隆,對短片段直接測序、拼接。人類基因組計劃最初使用老方法,後來一個公司使用了鳥槍法,最後兩種方法同時完成。
全基因組測序後為什麼還用sanger測序
現在全基因組測序bai用du鳥槍法,把所 有dna打碎zhi成短片段,測出所有dao片段的序列再用回超級計算機進行答 拼接。你說的是老方法,先構建大的長片段文庫,這些長片段互相重疊,能涵蓋全部基因組,即所謂的骨架scaffold。然後在對文庫裡每一個克隆進行亞克隆,應該還進行亞亞克隆,得到可以直接測...
書上說 Sanger法測序，其中的底物dNTP每個測序體系只要標記一種。這是不是講，每個測序體裡面除了某一
只有ddntp會有標記，四種 該方法的原理是 由於ddntp的2 和3 都不含羥基，在dna合成反應中版 不能形成磷權 酸二酯鍵，因此可以被用來中斷dna合成反應。在4個dna合成反應體系中分別加入一定比例的帶有放射性同位素標記的某種ddntp，通過凝膠電泳和放射自顯影后，可以根據電泳帶的位置確定待...
dna測序為什麼要測整個基因組,DNA測序為什麼要測整個基因組
在基因組研究領域,人們對資料的可信度有一個基本的要求 單個鹼基越準確越好,對單個鹼基的覆蓋深度越多倍越好,對整個基因組測得越完整越好,測序的 缺口 gap 越少越好。新一代測序中,基因從頭測序和重測序有什麼區別?我要做乙肝病毒dna全長測序,應該選用哪種方法?1 條件不同 從頭測序的條件是不依賴於任...