細胞凍存液解凍後4度冰箱可以放多久

2021-03-03 20:47:02 字數 632 閱讀 2856

1樓:pneumatic叮

細胞凍存1.預先配製抄凍存液:襲10%dmso+90%胎牛血清,4°C冰箱儲存預冷;2.

用胰酶對細胞進行消化:倒去培養瓶中的培養基或用槍小心吸去培養板中的培養基,pbs沖洗兩次,用胰酶消化細胞(儘可能溫和);3.再次用完全培養液懸浮細胞,將預冷的凍存液加入消化完全的細胞中,用滴管輕輕吹打混勻.

4.在每支凍存管中加入1ml細胞液,密封后標記凍存細胞名稱和凍存日期.5.

凍存步驟的細緻直接關係到細胞復甦時的活力,如果有程式降溫器(放在-80°C冰箱過夜,放入液氮罐)最好;或者可以在4°C,2h;然後轉到-20°C,2h;-80°C,2h;放入液氮罐.這是我實驗中用的protocol,

細胞在負80冰箱能放多久

2樓:掠過那片回憶

一般凍存盒中加入甘油的居多吧。丙二醇,異丙醇加入後,一方面防止由於溶液效應而使細胞脫水及蛋白質變性;另一方面在稍低於溶液冰點時人工強行誘導結冰,以免出現溶液過冷現象,防止結冰時釋放潛熱引起溫度回升,以及形成大的冰晶,減輕對細胞的損傷。在一步冷凍中.選用高濃度的滲透性保護劑組成的玻璃化溶液,在冷凍過程中,不發生結晶而形成玻璃樣固體,維持液態時的正常分子與離子分佈,使細胞內發生玻璃化而起到保護作用

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