如果提取的質粒DNA汙染有少量染色體DNA,你們在操作過程中哪既不最可能出現問題

2021-04-20 16:51:39 字數 1342 閱讀 9064

1樓:

.加入裂解液的時來候顛倒混勻的動自

作幅度bai太大,

會導du致基因組dna斷裂成小片段,和zhi質粒混dao在一起。

沉澱以後,吸取上清液的時候不小心吸入沉澱,會把夾在沉澱中的基因組dna也一起吸入矽膠吸附柱,這一步的可能性更大,通常都是這一步混入的基因組dna。.

2樓:共公的後代

把問題寫明白了再問效果最最佳。看到你的問題就一個字,暈!!!

在質粒提取過程中,如何避免染色體dna汙染?為什麼

3樓:芸芸眾小生

加入裂解液bai的時候顛倒混勻的動du

作幅度太大,

會導zhi致基因組daodna斷裂

成小片段,和質專粒混在一屬起。

沉澱以後,吸取上清液的時候不小心吸入沉澱,會把夾在沉澱中的基因組dna也一起吸入矽膠吸附柱,這一步的可能性更大,通常都是這一步混入的基因組dna。

質粒dna的提取與基因組dna的提取在原理和方法方面有何異同

4樓:哊點壞

質粒dna提取一般抄用沸水浴法和襲鹼裂解法,bai現在一般都採用du鹼裂解法,並有試劑盒可用zhi。它主要是dao將細胞內的環狀質粒提取出來,一般需要用sds裂解,rna酶降解,然後過柱,再進行洗脫.過程比較簡單。

而基因組dna提取則較為複雜,也需要用sds裂解和rnd酶降解,但降解時間較長,同時對有些革蘭氏陽性細菌還要進行溶菌酶處理,最後用氯仿-苯酚進行除蛋白,這一步重複進行多次,在用氯仿除去多餘的苯酚,用乙醇清洗烘乾後溶於te緩衝液中。整個過程比提質粒更復雜,耗時也更長。

怎樣避免質粒提取基因組dna汙染

5樓:道峰山營

加溶液2後不要劇烈搖晃,溶液2處理時間不能太久,一般顛倒6-8次即加溶液3中和內,這都是為了避容免鹼裂解基因組;

加溶液3後要混合充分,離心後取上清小心不要吸到白色沉澱,那裡有組蛋白包著的基因組dna。

脫氧核糖核酸(英語:deoxyribonucleic acid,縮寫為dna)又稱去氧核糖核酸,是一種分子,雙鏈結構,由脫氧核糖核苷酸(成分為:脫氧核糖及四種含氮鹼基)組成。

可組成遺傳指令,引導生物發育與生命機能運作。

主要功能是長期性的資訊儲存,可比喻為「藍圖」或「食譜」。其中包含的指令,是建構細胞內其他的化合物,如蛋白質與rna所需。

帶有遺傳訊息的dn**段稱為基因,其他的dna序列,有些直接以自身構造發揮作用,有些則參與調控遺傳訊息的表現。‍

6樓:匿名使用者

用試劑盒還好啊,加了溶液3馬上離心

質粒dna純化的試驗原理,質粒DNA純化的試驗原理

溴化乙錠通過嵌入鹼基之間而與dna結合,進而使雙螺旋解旋。由此導致線狀dna的長度有所增加,作為補償,將在閉環質粒dna中引入超螺旋單位。最後,超螺旋度大為增加,從而阻止了溴化乙錠分子的繼續嵌入。但線狀分子不受此限,可繼續結合更多溴化乙錠,直至達到飽和 每2個鹼基對大約結合1個溴化乙錠分子 由於染料...

血樣dna提取方法有哪些,血液提取DNA的有關問題

最經典的是酚氯仿法,提取的dna儲存時間長,但是比較麻煩。其次是chelex 100法,dna儲存時間短,適合短期內用。試劑盒法,省時省力,效果好,但是 貴,老闆有錢的話,推薦此法。血液中dna的提取方法 1 將冰凍的血在室溫下溶化 2 取1ml血液轉入一無菌的2ml離心管中,加入等體積的pbs磷酸...

線粒體dna不用試劑盒怎麼提取,腸道菌群的dna提取試劑盒 能提出來線粒體的dna 嗎

提取線粒體dna方法 僅供參考 1 triton法 取10的7次方細胞沉澱,懸浮於5ml的triton溶解液中.溫和振盪片刻後,室溫下放置10min.反應完畢的溶液以8000r min離心1min,上清即為mtdna.2 鹼變性法 取107細胞沉澱,依次加入溶液a 4 150 l,冰浴中將沉澱吹打分...