實驗室消毒滅菌方法

2022-03-17 23:22:47 字數 5433 閱讀 4304

1樓:匿名使用者

一、消毒技術

(一)明確消毒的主要物件 應具體分析引起感染的途徑、涉及的媒介物及病原微生物的種類,有針對性地使用消毒劑。

(二)採取適當的消毒方法 根據消毒物件選擇簡便一、消毒技術(一)明確消毒的主要物件應具體分析引起感染的途徑、涉及的媒介物及病原微生物的種類,有針對性地使用消毒劑。(二)採取適當的消毒方法根據消毒物件選擇簡便、有效、不損壞物品、**豐富、**適中的消毒方法。醫院診療器械按汙染後可造成的危害程度和在人體接觸部位不同分為三類:

1. 高度危險的器材穿過**、粘膜而進入無菌的組織或器官內部,或與破損的**粘膜密切接觸的器材,如手術器械、注射器、心臟起搏器等。必須選用高效消毒法(滅菌)。

2. 中度危險的器材僅與**、粘膜密切接觸,而不進入無菌組織內,如內窺鏡、體溫計、氧氣管、呼吸機及所屬器械、麻醉器械等。應選用中效消毒法,殺滅除芽胞以外的各種微生物。

3. 低度危險器材和物品不進入人體組織,不接觸粘膜,僅直接或間接地與健康無損的**接觸,如果沒有足夠數量的病原微生物汙染,一般並無危害,如口罩、衣被、藥杯等,應選用低效消毒法或只作一般衛生處理。只要求去除一般細菌繁殖體和親脂病毒。

(三)控制影響消毒效果的因素 許多因素會影響消毒劑的作用,而且各種消毒劑對這些因素的敏感性差異很大。1. 微生物的種類不同型別的病原微生物對消毒劑抵抗力不同,因此,進行消毒時必須區別對待。

(1)細菌繁殖體易被消毒劑消滅,一般革藍氏陽性細菌對消毒劑較敏感,革藍氏陰性桿菌則常有較強的抵抗力。繁殖體對熱敏感,消毒方法以熱力消毒為主。(2)細菌芽胞芽胞對消毒因子耐力最強,殺滅細菌芽胞最可靠的方法是熱力滅菌,電離輻射和環氧乙烷燻蒸法。

在化學消毒劑中,戊二醛、過氧乙酸能殺滅芽胞,但可靠性不如熱力滅菌法。(3)病毒對消毒因子的耐力因種類不同而有很大差異,親水病毒的耐力較親脂病毒強。(4)真菌對乾燥、日光、紫外線以及多數化學藥物耐力較強,但不耐熱(60℃1小時殺滅)。

2. 微生物的數量汙染的微生物數量越多需要消毒的時間就越長,劑量越大。3.

有機物的存在①有機物在微生物的表面形成保護層妨礙消毒劑與微生物的接觸或延遲消毒劑的作用,以致於微生物逐漸產生對藥物的適應性。②有機物和消毒劑作用,形成溶解度比原來更低或殺菌作用比原來更弱的化合物。③一部分消毒劑與有機物發生了作用,則對微生物的作用濃度降低。

④有機物可中和一部分消毒劑。消毒劑中重金屬類、表面活化劑等受有機物影響較大,對戊二醛影響較小。4.

溫度隨著溫度的升高,殺菌作用增強,但溫度的變化對各種消毒劑影響不同。如甲醛、戊二醛、環氧乙烷的溼度升高1倍時,殺菌效果可增加10倍。而酚類和酒精受溫度影響小。

5. ph值從兩方面影響殺菌作用。①對消毒劑的作用:

改變其溶解度和分子結構。②ph過高或過低對微生物的生長均有影響。在酸性條件下,細菌表面負電荷減少,陰離子型消毒劑殺菌效果好。

在鹼性條件下,細菌表面負電荷增多,有利於陽離子型消毒劑發揮作用。6. 處理劑量與監測保證消毒、滅菌處理的劑量,加強效果監測,防止再汙染。

二、滅菌技術(一)高壓蒸汽滅菌法的注意事項第一,無菌包不宜過大(小於50cm×30cm×30cm),不宜過緊,各包裹間要有間隙,使蒸汽能對流易滲透到包裹**。消毒前,開啟貯槽或盒的通氣孔,有利於蒸汽流通。而且排氣時使蒸汽能迅速排出,以保持物品乾燥。

消毒滅菌完畢,關閉貯槽或盒的通氣孔,以保持物品的無菌狀態。第二,布類物品應放在金屬類物品上,否則蒸汽遇冷凝聚成水珠,使包布受潮。阻礙蒸汽進入包裹**,嚴重影響滅菌效果。

第三,定期檢查滅菌效果。經高壓蒸汽滅菌的無菌包、無菌容器有效期以1周為宜。高壓蒸汽滅菌效果的監測:

有以下三種方法:第一種是工藝監測,又稱程式監測。根據安裝在滅菌器上的量器(壓力錶、溫度表、計時錶)、圖表、指示針、報警器等,指示滅菌裝置工作正常與否。

此法能迅速指出滅菌器的故障,但不能確定待滅菌物品是否達到滅菌要求。此法作為常規監測方法,每次滅菌均應進行第二種是化學指示監測。利用化學指示劑在一定溫度與作用時間條件下受熱變色或變形的特點,以判斷是否達到滅菌所需引數。

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一、針對不同型別微生物的消毒、滅菌

不同型別的病原微生物對消毒劑抵抗力不同,因此,進行消毒時必須區別對待。

(1)細菌繁殖體易被消毒劑消滅,繁殖體對熱敏感,消毒方法以熱力消毒為主。

(2)細菌芽孢對消毒因子耐力最強,殺滅細菌最可靠的方法是熱力滅菌,電離輻射和環氧乙烷燻蒸法。在化學消毒劑中,戊二醛、過氧乙酸能殺滅芽孢,但可靠性不如熱力滅菌法。

(3)病毒對消毒因子的耐力因種類不同而有很大差異,親水病毒的耐力較親脂病毒強。

(4)真菌對乾燥、日光、紫外線以及多數化學藥物耐力較強,但不耐熱(60℃1小時殺滅)。

汙染的微生物數量越多需要消毒的時間就越長,劑量越大。

二、針對有機物的的消毒、滅菌

(1)有機物在微生物的表面形成保護層妨礙消毒劑與微生物的接觸或延遲消毒劑的作用,以致於微生物逐漸產生對藥物的適應性。

(2)有機物和消毒劑作用,形成溶解度比原來更低或殺菌作用比原來更弱的化合物。

(3)一部分消毒劑與有機物發生了作用,則對微生物的作用濃度降低。

(4)有機物可中和一部分消毒劑。消毒劑中重金屬類、表面活化劑等受有機物影響較大,對戊二醛影響較小。

3樓:一顆甜果子

1.乾熱滅菌法

是利用恆溫乾燥箱內120℃~150℃的高熱,並保持90~120分鐘,殺死細菌和芽孢,達到滅菌目的的一種方法。主要適用於不便在壓力蒸汽滅菌器中進行滅菌,且不易被高溫損壞的玻璃器皿、金屬器械以及不能和蒸汽接觸的物品的滅菌。用此方法滅菌的物品乾燥,易於貯存。

酒精燈火焰燒灼滅菌法也是屬於乾熱滅菌的方法之一,在進行動物細胞體外培養工作時,常須利用工作臺面上的酒精燈火焰對金屬器具及玻璃器皿口緣進行補充滅菌。

2.溼熱滅菌法

壓力蒸汽溼熱滅菌法是目前最常用的一種滅菌方法。它利用高壓蒸汽以及在蒸汽環境中存在的潛熱作用和良好的穿透力,使菌體蛋白質凝固變性而使微生物死亡。適合於布類工作衣、各種器皿、金屬器械、膠塞、蒸餾水、棉塞、紙和某些培養液的滅菌。

高壓蒸汽滅菌器的蒸汽壓力一般調整為1.0~1.1 kg/cm2,維持20~30min即可達到滅菌效果。

3.射線滅菌法

利用紫外線燈進行照射滅菌的方法。紫外線是一種低能量的電磁輻射,可以殺滅多種微生物。紫外線的作用機制是通過對微生物的核酸及蛋白質等的破壞作用而使其滅活。

適合於實驗室空氣、地面、操作檯面滅菌。滅菌時間為30min。用紫外線殺菌時應注意,不能邊照射邊進行實驗操作,因為紫外線不僅對人體**有傷害,而且對培養物及一些試劑等也會產生不良影響。

4.過濾除菌法

是將液體或氣體通過有微孔的濾膜過濾,使大於濾膜孔徑的細菌等微生物顆粒阻留,從而達到除菌的方法。過濾除菌法大多用於遇熱易發生分解、變性而失效的試劑、酶液、血清、培養液等。

目前,常用微孔濾膜金屬濾器或塑料濾器正壓過濾除菌,或用玻璃細菌濾器、濾球負壓過濾除菌。濾膜孔徑應在0.22~0.

45μm範圍內或用更小的細菌濾膜,溶液通過濾膜後,細菌和孢子等因大於濾膜孔徑而被阻,並利用濾膜的吸附作用,阻制小於濾膜孔徑的細菌透過。

5.化學消毒劑消毒法

用於那些不能利用物理方法進行滅菌的物品、空氣、工作面、操作者**、某些實驗器皿等。常用的化學消毒劑包括甲醛、高錳酸鉀、70%~75%乙醇、過氧乙酸、來蘇爾水、0.1%新潔爾滅、環氧乙烷、碘伏或碘酊等。

其中利用70%~75%乙醇、0.1%~0.2%氯化汞、10%次氯酸鈉、飽和漂白粉等進行實驗材料的滅菌;利用甲醛加高錳酸鉀[(2ml甲醛+1g高錳酸鉀)/m3]或乙二醇(6ml/m3)等加熱燻蒸法進行無菌室和培養室的消毒。

在使用時應注意安全,特別是用在**或實驗材料上的消毒劑,須選用合適的藥劑種類、濃度和處理時間,才能達到安全和滅菌的目的。

6.抗生素抑菌

主要用於培養液,是培養過程中預防微生物汙染的重要手段以及作為微生物汙染不嚴重時的「急救」措施。常用的抗生素有青黴素、鏈黴素和新黴素等。

實驗室消毒滅菌方法

4樓:快樂小子

一、消毒技術(一)明確消毒的主要物件 應具體分析引起感染的途徑、涉及的媒介物及病原微生物的種類,有針對性地使用消毒劑。(二)採取適當的消毒方法 根據消毒物件選擇簡便

一、消毒技術

(一)明確消毒的主要物件

應具體分析引起感染的途徑、涉及的媒介物及病原微生物的種類,有針對性地使用消毒劑。

(二)採取適當的消毒方法

根據消毒物件選擇簡便、有效、不損壞物品、**豐富、**適中的消毒方法。

醫院診療器械按汙染後可造成的危害程度和在人體接觸部位不同分為三類:

1. 高度危險的器材

穿過**、粘膜而進入無菌的組織或器官內部,或與破損的**粘膜密切接觸的器材,如手術器械、注射器、心臟起搏器等。必須選用高效消毒法(滅菌)。

2. 中度危險的器材

僅與**、粘膜密切接觸,而不進入無菌組織內,如內窺鏡、體溫計、氧氣管、呼吸機及所屬器械、麻醉器械等。應選用中效消毒法,殺滅除芽胞以外的各種微生物。

3. 低度危險器材和物品

不進入人體組織,不接觸粘膜,僅直接或間接地與健康無損的**接觸,如果沒有足夠數量的病原微生物汙染,一般並無危害,如口罩、衣被、藥杯等,應選用低效消毒法或只作一般衛生處理。只要求去除一般細菌繁殖體和親脂病毒。

(三)控制影響消毒效果的因素許多因素會影響消毒劑的作用,而且各種消毒劑對這些因素的敏感性差異很大。

1. 微生物的種類

不同型別的病原微生物對消毒劑抵抗力不同,因此,進行消毒時必須區別對待。

1)細菌繁殖體

易被消毒劑消滅,一般革藍氏陽性細菌對消毒劑較敏感,革藍氏陰性桿菌則常有較強的抵抗力。繁殖體對熱敏感,消毒方法以熱力消毒為主。

(2)細菌芽胞

芽胞對消毒因子耐力最強,殺滅細菌芽胞最可靠的方法是熱力滅菌,電離輻射和環氧乙烷燻蒸法。在化學消毒劑中,戊二醛、過氧乙酸能殺滅芽胞,但可靠性不如熱力滅菌法。

(3)病毒

對消毒因子的耐力因種類不同而有很大差異,親水病毒的耐力較親脂病毒強。

(4)真菌

對乾燥、日光、紫外線以及多數化學藥物耐力較強,但不耐熱(60℃1小時殺滅)。

2. 微生物的數量

汙染的微生物數量越多需要消毒的時間就越長,劑量越大。

3. 有機物的存在

①有機物在微生物的表面形成保護層妨礙消毒劑與微生物的接觸或延遲消毒劑的作用,以致於微生物逐漸產生對藥物的適應性。②有機物和消毒劑作用,形成溶解度比原來更低或殺菌作用比原來更弱的化合物。③一部分消毒劑與有機物發生了作用,則對微生物的作用濃度降低。

④有機物可中和一部分消毒劑。消毒劑中重金屬類、表面活化劑等受有機物影響較大,對戊二醛影響較小。

4. 溫度

隨著溫度的升高,殺菌作用增強,但溫度的變化對各種消毒劑影響不同。如甲醛、戊二醛、環氧乙烷的溼度升高1倍時,殺菌效果可增加10倍。而酚類和酒精受溫度影響小。

5. ph值

從兩方面影響殺菌作用。①對消毒劑的作用:改變其溶解度和分子結構。

②ph過高或過低對微生物的生長均有影響。在酸性條件下,細菌表面負電荷減少,陰離子型消毒劑殺菌效果好。在鹼性條件下,細菌表面負電荷增多,有利於陽離子型消毒劑發揮作用。

6. 處理劑量與監測

保證消毒、滅菌處理的劑量,加強效果監測,防止再汙染。

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