宿主因子啟用劑的篩選方法有哪些

2025-06-05 02:45:20 字數 1134 閱讀 9937

1樓:網友

一種篩選目標病毒相關宿主因子的方法,其特徵在於,包括以下步驟:/n(1)利用載體系統和crispr文庫建立覆蓋靶向模式動物全基因組或部分功能基因的突變細胞庫;/n(2)對突變細胞庫進行目標病毒的攻毒實驗,收集存活細胞,獲得抗病毒突變細胞庫;/n(3)對抗病毒突變細胞庫進行深度測序,確定該目標病毒相關宿主因子。/n

技術特徵摘要】

1)利用載體系統和crispr文庫建立覆蓋靶向模式動物全基因組或部分功能基因的突變細胞庫;

2)對突變細胞庫進行目標病毒的攻毒實驗,收集存活細胞,獲得抗病毒突變細胞庫;

3)對抗病毒突變細胞庫進行深度測序,確定該目標病毒相關宿主因子。

1)篩選優化的sgrna序列,構建crispr文庫;

2)將crispr文庫中的sgrna序列匯入載體,構建載體-crispr文庫,建立核酸酶蛋白表達系統;

3)將載體-crispr文庫和核酸酶蛋白表達系統轉染入細胞,篩選後剔除轉基因陰性的細胞,得到突變細胞庫。

3.如權利要求2所述的方法,其特徵在於,步驟1)所述優化的sgrna長度20nt,每個基因設計5-6條sgrna;

優化的sgrna序列通過以下方法篩選得到:設計針對每個基因的sgrna,在轉錄sgrna的載體中,將pam序列新增至sgrna序列之後、莖環手衫結構的轉錄終止序列之前;或在轉錄sgrna的載體中,將與u6之後sgrna相同的sgrna序列以及畢激腔pam序列新增至莖環結構的轉錄鉛判終止序列之後;

所述莖環結構的轉錄終止序列如所示,所述pam序列為ngg或ggg。

2樓:如果是一枚

宿主因子啟用劑的篩選方法有哪些!他這種篩選方法可以用初級,然後進行篩選,因為他這個因子啟用的話答歲晌,那麼他這個如果把陣列的因子啟用那就會變異,所以它這個啟用劑也就是比較好的,所以它這個篩選方法一般是採用它的放大鏡或者是一些比較好看的,也就是把它的清鋒放大,雀乎所以他這個時候就需要用到它的放大鏡,或者是寫微信進行篩選。

3樓:愛自吸

他這種篩選方法可以用初級,然後進行篩選,因為他這個因子啟用的話,那麼他這個如果把陣列的因子啟用頃念那就會變異,所以它這個啟用劑也就是李乎悶比較好的,所以它這個篩選方法一般是採用它的放大鏡或者是一些比較好看的哪彎,也就是把它的放大,所以他這個時候就需要用到它的放大鏡,或者是寫微信。