高效液相色譜流動相ph有何影響

2025-07-05 13:50:08 字數 1961 閱讀 9520

1樓:千葉雅之

如果是中性物質,水相ph值的酸鹼性對它沒什麼影響。

不過酸性物質和鹼性物質的影響就比較大。比如,鹼性物質在ph值的緩衝液裡保留時間就會比較靠後,如果ph值變成,那麼保留時間肯定會前移。

另外水相ph值對於峰型也會有影響。所以水相ph值通常是根據被測物質的pka值來確定的。

2樓:巨蟹白少玲

對於弱酸,流動相的ph值越小,組分的k值越大,當ph值遠遠小於弱酸的pka值時,弱酸主要以分子形式存在;對弱鹼,情況相反。分析弱酸樣品時,通常在流動相中加入少量弱酸,常用50mmol/l磷酸鹽緩衝液和1%醋酸溶液;分析弱鹼樣品時,通常在流動相中加入少量弱鹼,常用50mmol/l磷酸鹽緩衝液和30mmol/l三乙胺溶液。

流動相中加入有機胺可以減弱鹼性溶質與殘餘矽醇基的強相互作用,減輕或消除峰拖尾現象。所以在這種情況下有機胺(如三乙胺)又稱為減尾劑或除尾劑。

為什麼hplc中流動相的組成和ph對組分的滯留和分離影響很大

3樓:匿名使用者

假設我們要檢測乙個親水性物質,如果流動相里水的比例高,那麼就不容易被柱子吸附,這樣分離效果就不好。這種情況下需要考慮減少水的比例。ph的話我是用來驗證流動相配製的比例的,比如標準是9,要是測出來是11可能流動相有問題。

請教:流動相的酸鹼性的選擇有什麼影響

4樓:千葉雅之

乙個是對峰型有影響,如果ph值選的不好,色譜峰會出現大拖尾。

乙個是對保留時間的影響。如果待測物質是中性的,那麼ph值就沒什麼影響。不過如果待測物本身有酸鹼性,那麼影響就比較大了。

比如說,乙個鹼性物質,流動相的ph值越小(就是流動相酸性越大),樣品的保留時間越往前移。

一般流動相的ph值是根據樣品的pka值或者pkb值來確定的。

高效液相色譜 流動相ph值?

5樓:匿名使用者

是指緩衝液的ph。加了有機相對ph影響不大,在柱子的耐受範圍內就行,樓主不必擔心。但是下次不要再做錯了。

高效液相色譜法對流動相有哪些要求

6樓:清風異彩

(1)溶劑對於待測樣品。必須具有合適的極性和良好的選擇性。

2)溶劑要與檢測專器匹配。對於紫外屬吸收檢測器,應注意選用檢測器波長比溶劑的紫外截止波長要長。所謂溶劑的紫外截止波長指當小於截止波長的輻射通過溶劑時,溶劑對此輻射產生強烈吸收,此時溶劑被看作是光學不透明的,它嚴重干擾組分的吸收測量。

對於折光率檢測器,要求選擇與組分折光率有較大差別的溶劑作流動相,以達最高靈敏度。

3)高純度。由於高效液相靈敏度高,對流動相溶劑的純度也要求高。不純的溶劑會引起基線不穩,或產生「偽峰」。痕量雜質的存在,將使截止波長值增加50~ioonm。

4)化學穩定性好。不能選與樣品發生反應或聚合的溶劑。

5)低粘度。若使用高粘度溶劑,勢必增高壓力,不利於分離。常用的低粘度溶劑有丙酮、乙醇、乙晴等。

但粘度過於低的溶劑也不宜採用,例戊烷、乙醚等,它們易在色譜柱或檢測器內形成氣泡,影響分離。

高效液相色譜柱的分離測試中流動相中ph應控制在什麼範圍內

7樓:網友

這要看你的被測物質和色譜柱耐受程度。這個沒有乙個準確範圍,反向色譜常用的c18柱是在酸性條件下(ph2~8)工作的。

其他色譜柱在使用時首先就是要了解色譜柱的ph工作範圍,檢視說明書就能知道你的色譜柱是在什麼ph環境下工作的。其次就是你樣品中物質組成,化合物pka值與流動相ph值關係到化合物的解離狀態,所以物質的pka值是設定ph範圍的重要依據。

高效液相色譜儀流動相選擇應該遵循什麼樣的原則?

8樓:網友

有機相和非有機相,一般有乙腈+水,甲醇+水,有時候還可以有三相或四相,加酸和加鹽改善分離。

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