1樓：淺笑莓丶
從你的兩個圖的縱座標來看，可能是儀器讀取時有問題。請檢查儀器是否有損壞，或者板子、封口膜是否與儀器相容，反應溶液是否有氣泡。下面乙個圖如果儀器沒有問題則可以說擴增失敗。
定量pcr目的基因擴增曲線不好但是ct值很高怎麼回事
2樓：南京金益柏生物科技****
你反轉bai錄後的cdna的濃度測了沒有？
du完zhi全可以增加模板dao量，體系中的水全部內用模板替代。容提取rna時候注意在冰上進行免得降解現在血清裡內參好像沒統一標準，我用gapdh,β-actin效果都不太好；
另外，我做的血清提rna，濃度不高，最後跑出來ct值最小的也在30以上。
qpcr 溶解曲線的基線特別高是什麼原因
3樓：滴答滴答小灰狼
溶解曲線的意思是：當溫度高於擴增產物的tm值時，雙鏈產物變單鏈，螢光值因為這樣的變化而產生變化，根據這一原理，你推算你的體系是是否會在溫度變化時產生螢光值的變化，比如你用的是taqman探針，taqman探針產生螢光變化的原理是探針被外。
求助螢光定量pcr，我的實驗組和對照組的目的基因ct值非常相近，但是兩組內參基因的ct值相差5左右，正常嗎
4樓：網友
你的實驗組和度招租的模板濃度不一樣吧，那樣內參基因的ct值肯定是不一樣的！
5樓：網友
正常的，因為你提取兩個材料的rna的量不同。你根據資料算下表達量具體是差幾倍，看是否與你的預期相符。
如何通過螢光定量目的基因和gapdh計算相對錶達量
6樓：匿名使用者
如何通過螢光定量目的基因和gapdh計算相對錶達量內參就是乙個表達量在各個組基本保持不變的基因，又叫看家基因，比如常用的gapdh， actin。或者18s rrna也可以。
如果內參表達量一致，說明你pcr的上樣量一致，樣本的質量也一致。如果出入很大，說明你的樣本的濃度或者是質量有問題。測到的目的基因的表達量就不可靠了。
管家基因是用來定量的。用來計算相對錶達量。管家基因在相同量樣品中的表達量我們認為是一致的。
然後根據這個量來計算你的基因在不同樣品中的表達量。所以每乙個都需要單獨的樣品。基因組干擾需要你在提取rna以後用dnase處理樣品。
如果不放心，可以拿處理過的rna做膜版，跑一次，如果有帶就是有汙染，如果沒有可以合成cdna庫了。
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