電泳法可以測蛋白質濃度麼
1樓:網友
只能估算,一般就是跑電泳然後染色,但不是很精確,能定性不能定量。
還有一種比較複雜,就是放射自顯影的wb,定量相對來說好些。
2樓:網友
看它的條帶大小跟染色深淺了,沒法做到絕對的定量,都是乙個相對的值了。
你比如western blot,就是先跑sds-page電泳,然後孵育一抗、二抗,通過結合二抗的多少來確定蛋白的多少。
蛋白電泳時電泳液過多會導致玻璃板裂開嗎
3樓:噼裡啪啦醬
可以通過電泳直接測得蛋白質的濃度 (1)由於與凝膠聚合有關的矽橡膠稱、玻璃板表面不光滑潔淨,在電泳時會造成凝膠板與玻璃板或矽橡膠條剝離,產生氣泡或滑膠;剝膠時凝膠板易斷裂,為防止引現象,所用器材均應嚴格地清洗。矽橡膠條的凹槽、樣品槽模板及電泳槽用泡沫海綿蘸取「洗潔淨」仔細清洗。玻璃板浸泡在重鉻酸鉀洗液3~4h或 koh的酒精溶液中20min以上,用清水洗淨,再用泡沫海綿蘸取「洗潔淨」反覆刷洗,最後用蒸餾水沖洗,直接陰乾或用乙醇沖洗後陰乾。
sds-page電泳分離蛋白質的原理,這種方法為什麼可以測定蛋白質分子量
4樓:楊必宇
因為通過生化方bai法吧蛋白提取出來,du蛋白質帶有電。
zhi荷麼,是將dao混合樣品中的蛋白質回,其原理是第答一向基於蛋白質 pi 不同用等電聚焦,電泳時的正極與負極都會發生電解反應,向著與其電性相反的電極移動的現象稱為電泳。
在外電場的作用下,帶點顆粒將向著與其電性相反的電極移動,這種現象稱為電泳。電泳技術可用於氨基酸、肽、蛋白質和核苷酸等生物分子的分析分離和製備。 區帶電泳是由於在支援物上電泳蛋白質混合物被分離為若干區帶。
5樓:飛一樣的生活中
sts,png電池分離蛋白質的原理這種方法可以測定蛋白質的分解,直接用嗯電解質分離蛋白質。
6樓:獅子xy愛我
因為電池蛋白質通過這個可以監測出。
雙向電泳中樣品蛋白質濃度要求?最好能具體說明!
7樓:糟油酒丸
要看樓主你所有的儀器和ief strip的要求吧?我用過的是這家公司的ge healthcare。他們的蛋白質濃度要求就寫在使用手冊裡面。
一般來說濃度高些沒關係,上樣時反正會加緩衝液。上樣是根據蛋白質總量來上的,所以濃度太低時,儀器又限制了上樣總容積,會加不上去足夠的蛋白質量,最後膠拿出來染色,蛋白質點淡得看不見,拿去測序就更沒戲了。
2d步驟很多,需要優化,樓主如果沒有足夠的廠商技術支援或者前輩帶著,自己慢慢摸索有得你受的。
8樓:網友
我用的是伯樂的一套雙向電泳系統,關於蛋白濃度的問題得視你自己的樣品來定,其實手冊上給的參考蛋白濃度有點低,有時候甚至低了1倍,這需要你通過上樣量實驗來確定你的樣品到底上多少濃度最合適。
sds-聚丙烯凝膠電泳為什麼可以檢測出蛋白質的質量?
9樓:松鼠粉絲
原理是網狀的凝膠分子容許蛋白質分子通過,因為分子大小不同,通過的速度就有差異。不同濃度的凝膠,可以區分不同範圍的分子。
10樓:網友
不可以檢測質量啊 只是可以根據marker估計大概的分子量。
western 做電泳前為什麼要測蛋白濃度
11樓:北京索萊寶科技****
方便根據蛋白濃度進行調整各個上樣量,讓每個孔的樣本的蛋白含量都是一樣的,才有可比性。
12樓:匿名使用者
比如說你有5個樣本,但是呢這五個樣本的蛋白濃度你都不知道。
如果你在上樣孔加樣的時候要是都加入相同的量的話,比如都是10ml,每個孔的蛋白的量就不一致了,**出來的膠片上的趨勢也就說明不了問題。
13樓:芝加哥遊魂
一是為了控制上樣量,比如說一般上樣量總蛋白在60ug到100ug就能壓出條帶來了,那就可以根據濃度來算體積,尤其是珍貴的樣品,避免浪費。同理,如果濃度過低,超過一定體積的話,乙個孔就上不了了,這樣就可以通過一定的方法來濃縮蛋白。
二是為了保證各個孔的上樣量一樣。
蛋白質不純能做電泳實驗嗎?
14樓:匿名使用者
sds-page條帶只能測個大概,因為膠會變形,不過要求不高也可以這麼做。還有,蛋白質含量70%的意思是這是原始樣品吧?那先用丙酮沉澱法之類的方法洗滌去除雜質,然後提取跑膠。
15樓:網友
蛋白樣品蛋白含量為70%左右是用什麼方法測得呢?你能確保是你所要的目的蛋白大含量為70%嗎?如果能肯定,跑電泳後,從譜帶的丰度就可以估算出大概的分子量了。
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不能。來具體可以參考電路.那個電路沒 源問題。bai 就是電壓無限接近du電池電壓,當然,根據你的zhi電池電壓確定具dao體電路引數。不能控制電路在電腦裡。有ic控制充電電流的,充電電流過大會冒火的.一般是不可以bai直接給電池充du電.電池一 zhi般使用鋰電池,對於充電要dao求比內較高,不過...
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