即時定量PCR擴增曲線完全看不懂了。。

1樓：鑲邊旗袍

我覺得是定量曲線算錯加錯了應該是一條直線才是啊。

2樓：網友

可能這對引物不好，建議把擴增產物跑個電泳，看看是不是有目的條帶。如果沒有，再從新設計一對引物吧。

3樓：網友

是不是印務二聚體啊？

即時定量pcr擴增曲線怎麼分析

4樓：南京金益柏生物科技****

可能是模板濃度太低了，都沒有達到閾值的，剛開始要做不同濃度梯度的，摸一下模板濃度條件。

5樓：桑桑雙子的老巢

你好，擴增曲線可以粗略地判斷擴增效率。sybr green的雙delta ct法要求目的基因和內參的擴增效率基本一致。如果不一致，需要對公式進行修正，部分qpcr儀的配套軟體可以做到，直接輸入每對引物的擴增效率。

但無論如何，保證高擴增效率是實驗成功的關鍵。如果擴增效率一致，不同ct的曲線顯示出來就基本是平行的位移，其傾斜程度基本一致。而如下圖一樣，一條比較「陡」，另一條比較「平」，那麼意味著擴增效率不一致。

有可能是引物效率不一，或者個別樣品、反應孔存在抑制pcr的汙染等。

來自：肽度時界威客吳博士，有科研難題、科研需求就上肽度時界吧！

即時定量pcr的曲線圖怎麼看

6樓：愛利久mona老師

曲線，是微分幾何學研究的主要物件之一。直觀上，曲線可看成空間質點運動的軌跡。微分幾何就是利用微積分來研究幾何的學科。

為了能夠應用微積分的知識，我們不能考慮一切曲線，甚至不能考慮連續曲線，因為連續不一定可微。這就要我們考慮可微曲線。但是可微曲線也是不太好的，因為可能存在某些曲線，在某點切線的方向不是確定的，這就使得我們無法從切線開始入手，這就需要我們來研究導數處處不為零的這一類曲線，我們稱它們為正則曲線。

正則曲線才是經典曲線論的主要研究物件。

7樓：蹉秀雲夔賦

即時螢光定量pcr儀器怎麼用的。

用已知濃度的dna樣本（通常是質粒）梯度稀釋成一系列的樣本。做實驗的時候，這些標準品和待測樣本加在同樣一塊96孔盤的不同孔內。一起做pcr。

標準品的螢光強度和已知的濃度作圖，可以得到一條標準曲線。而待測樣本的螢光強度測出以後，就可以在標準曲線上算出樣本濃度了。

即時螢光定量pcr曲線怎麼分析

8樓：龍鳳油洺月

看螢光背景；

看擴增曲線形態（s）；

看ct值；靠擴增效率、

螢光定量pcr擴增曲線，開始有個下降的曲線

9樓：網友

從你這個圖上看，這是非特異性的擴增。訊號非常弱，而且都超過40個迴圈還沒有訊號。

之所以前面有下降，其實都是背景噪音訊號。你看縱座標的數值都非常的小。所以不是真正的擴增訊號，都是背景噪音干擾而已。沒有任何擴增產物。

定量pcr的擴增曲線的平臺期為什麼是鋸齒狀

10樓：網友

1、反應體系隨著pcr的進行，造成阻礙物增多，到平臺期時達到最高水平，影響機器的正常檢出；需要優化反應體系各個離子的含量。

2、機器本身不穩定造成的影響，不過這種情況很少發生。