慢病毒感染懸浮細胞平角離心的意義
1樓：打板模特找我
慢病毒感染細胞的時候是要換成無血清培養基。
常規轉染技術可分為兩大類，一類是瞬時轉染，一類是穩定轉染（永久轉染）。前者外源dna/rna不整合到宿主染色體中，因此乙個宿主細胞中可存在多個拷貝數，產生高水平的表達，但通常只持續幾天，多用於啟動子和其它調控元件的分析。一般來說，超螺旋質粒dna轉染效率較高，在轉染後24-72小時內（依賴於各種不同的構建）分析結果，常常用到一些報告系統如螢光蛋白，β半乳糖苷酶等來幫助檢測。
慢病毒轉染進細胞後細胞會漂浮起來嗎？為什麼慢病毒轉染進細胞24小時後要收集上清離心阿～？還有如何
2樓：匡雅霜
慢病毒轉染進細胞後細胞會漂浮起來嗎？
不會，除非你轉染太多，細胞死了。
為什麼慢病毒轉染進細胞24小時後要收集上清離心阿～？
因為慢病毒可以被細胞分泌出胞外，大量存在於血清中。收集上清多方便啊~還有如何流式測滴度？
流式細胞儀的原理就是將細胞分群，將感染和非感染的細胞分群。具體操作最好問專業的操作人員，因為每臺機子都不一樣……
什麼是懸浮細胞傳代的直接法和離心法,兩者各有什麼優缺點?
3樓：網友
是用酶液使貼壁細胞消化懸浮後傳代嗎？
直接法保留了酶液，可能對細胞的生長有一定的影響。離心法中懸浮吹打細胞後有離心操作，使細胞沉澱，去除上清液再加培養基，也就除掉了酶液。但是會損失細胞，如果rp不好或操作有瑕疵，可能細胞會丟失嚴重，甚至傳代後找不到細胞了。
這個我研究過的，因為最近也在做傳代和原代，歡迎交流。
慢病毒轉染細胞的操作步驟，求大神發乙份，感激不盡！！！
4樓：匿名使用者
你好，慢病毒轉染細胞的操作步驟如下：
1、慢病毒轉染前18-24小時，將貼壁細胞以1×10^5/孔鋪到24孔板中。使細胞在慢病毒轉染時的數量為2×10^5/孔左右。
2、第二天，用含有6 μg/ml polybrene的2ml新鮮培養基替換原培養基，加入適量病毒懸液。37℃孵育。
3、(對polybrene毒性敏感的細胞選作此步驟)4小時後加入2ml新鮮培養基以稀釋polybrene。
4、繼續培養24小時，用新鮮培養基替換含有病毒的培養基。
5、繼續培養。如果慢病毒含有螢光蛋白，一般轉染48小時後可見明顯螢光表達，72小時後更加明顯。如需facs檢測轉染效率，可在轉染後72-96小時進行。
如果慢病毒含有抗性基因並且需要加藥篩選，可以在轉染3-4天后開始加藥。
二、慢病毒轉染懸浮細胞實驗方法。
1、在2×10^5/ml懸浮細胞中加入polybrene至6 μg/ml和適量病毒，充分混勻。37℃孵育。或者150g室溫離心4小時(選作，部分難轉染的細胞系採用此步驟可以提高轉染效率)。
2、(對polybrene毒性敏感的細胞選作此步驟)4小時後(或離心結束後)加入等體積新鮮培養基以稀釋polybrene。
3、繼續培養3-4天。中間視細胞生長情況可傳代或換液。
名詞解釋慢病毒感染
5樓：小二愛運動
慢發病毒感染，是指經顯性或隱**染後，病毒有很長的潛伏期，此時機體無症狀，也分離不出病毒，以後出現慢性、進行性疾病，常導致死亡 。
如：愛滋病； 瘋牛症； 亞急性硬化性腦炎等。
慢病毒包括8種能夠感染人和脊椎動物的病毒，原發感染的細胞以淋巴細胞和巨噬細胞為主，感染個體最終發病。
慢病毒載體的研究發展得很快，研究的也非常深入。該載體可以將外源基因有效地整合到宿主染色體上，從而達到永續性表達。
在感染能力方面可有效地感染神經元細胞、肝細胞、心肌細胞、腫瘤細胞、內皮細胞、幹細胞等多種型別的細胞，從而達到良好的的基因**效果，因此具有廣闊的應用前景。
6樓：網友
鉅細胞病毒(cmv)是一種皰疹病毒，分佈廣泛。cmv感染可引起泌尿生殖系統、中樞神經系統、肝臟、肺、血液迴圈系統等病變，並與惡性腫瘤的發生可能有關。新近。
懸浮細胞做mtt怎樣離心
7樓：北京索萊寶科技****
一般做mtt法檢測時都需要將細胞置於96孔板內，無論是懸浮還是貼壁都一樣，如果是貼壁自然很簡單，如果是懸浮的，那麼就需要借用一中比較昂貴的儀器，就是板式離心機，一般實驗室不具備這種儀器，如果有的話，可以直接將96孔板置於上面離心後，新增mtt試劑參加反應。
8樓：匿名使用者
將細胞收集到離心管中1200rmp/min離心5min，然後按照你想要的密度重懸細胞。
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