1樓：網友
除了atg還需要有其他鹼基才能被酶識別並切割。所以首先要核實是否有完整的酶切位點，如果沒有，可以放心使用，如果有，需要換其他酶切位點。
構建表達載體時，兩個基因之間要間隔多少序列
2樓：匿名使用者
先看錶達載體有抄哪些合適的酶切位點bai，比如ndei,ncoi這樣識別序列有atg起始du密碼子的，再看看目的zhi基因含不含有dao這些位點，含有就不好連線了，挑好位點，計算下讀碼框是否正確，保證核糖體結合位點後的第乙個atg與目的基因是間隔3的倍數個鹼基。下游的位點更好選，如果有6xhis標籤，想融合表達的話，就注意下要是同一讀碼框，同時利用載體的終止密碼子，如果沒有這樣的需要，就利用目的基因本身的終止密碼子好了。基本是這樣，具體還是看看書吧。
有兩個連續起始密碼子的影響
3樓：網友
如果你用的是ndei這樣的酶切位點（catatg），之後緊接著目的基因的編碼區，那麼就相當於在翻譯的蛋白n端多了乙個m，可能不會影響蛋白摺疊以及功能，但是仍然使實驗本身不嚴謹，另外如果之後使用的抗體剛好識別的是n端，可能會有影響。
如果使用的是ncoi這樣的酶（ccatgg），atg序列後還有乙個鹼基，這樣就把之後所有讀碼框移動了。
4樓：匿名使用者
如果是連續的或兩個密碼子之間間隔鹼基數是3的倍數，沒啥影響否則，導致移碼突變，整個序列就全變了，這樣的化肯定不能表達。
5樓：匿名使用者
應該多少會有影響的~~
ncoi酶切位點中的ccatgg中改成ccatga還能切嗎
6樓：黯夜暴走
必須不能了。ncoi 這些都是特異性的酶。只識別特定的序列，序列改變了，不會切開的！
怎麼分析酶切位點
7樓：劍過城傾
酶切位點（restriction enzyme cutting site）：dna上一段鹼基的特定序列，限制性內切酶能夠識別出這個序列並在此將dna序列切成兩段。
可能存在同尾酶，不同酶的識別序列不同，有的可能能識別多個酶切位點比如sty1識別序列有ww
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