培養基配製ph調節,培養基配製ph調節

2021-05-02 09:13:12 字數 2219 閱讀 4883

1樓:

一般是用碳酸氫鈉配成鹼性~再用稀鹽酸調成7.0左右~

lb培養基如何配製?

2樓:

以配製一升培養基為例:

應該在950 ml去離子水中加入:

胰蛋白腖10g

酵母提取物5g

nacl 10g

搖動容器直至溶質溶解。用5mol/lnaoh調ph至7.0,用去離子水定容至1l。在15psi高壓下蒸汽滅菌21min。

擴充套件資料:

配置原則:

1、選擇適宜的營養物質

就微生物主要型別而言,有細菌、放線菌、酵母菌、黴菌、原生動物、藻類及病毒之分,培養它們所需的培養基各不相同。

在實驗室中常用牛肉膏蛋白腖培養基(或簡稱普通肉湯培養基)培養細菌,用高氏i號合成培養基培養放線菌,培養酵母菌一般用麥芽汁培養基,培養黴菌則一般用查氏合成培養基。

2、營養物質濃度及配比合適

培養基中營養物質濃度合適時微生物才能生長良好,營養物質濃度過低時不能滿足微生物正常生長所需,濃度過高時則可能對微生物生長起抑制作用。

另外,培養基中各營養物質之間的濃度配比也直接影響微生物的生長繁殖和(或)代謝產物的形成和積累,其中碳氮比(c/n)的影響較大。嚴格地講,碳氮比指培養基中碳元素與氮元素的物質的量比值,有時也指培養基中還原糖與粗蛋白之比。

3、控制ph條件

培養基的ph必須控制在一定的範圍內,以滿足不同型別微生物的生長繁殖或產生代謝產物。各類微生物生長繁殖或產生代謝產物的最適ph條件各不相同,一般來講,細菌與放線菌適於在ph7-7.5範圍內生長,酵母菌和黴菌通常在ph4.

5-6範圍內生長。

值得注意的是,在微生物生長繁殖和代謝過程中,由於營養物質被分解利用和代謝產物的形成與積累,會導致培養基ph發生變化,若不對培養基ph條件進行控制,往往導致微生物生長速度下降或(和)代謝產物產量下降。

4、控制氧化還原電位(redox potential)

不同型別微生物生長對氧化還原電位(f)的要求不一樣,一般好氧性微生物在f值為+0.1v以上時可正常生長,一般以+0.3一+0.

4v為宜,厭氧性微生物只能在f值低於+0.1v條件下生長,兼性厭氧微生物在f值為+0.1v以上時進行好氧呼吸,在+0.

1v以下時進行發酵。

5、原料**的選擇

在配製培養基時應儘量利用廉價且易於獲得的原料作為培養基成分,特別是在發酵工業中,培養基用量很大,利用低成本的原料更體現出其經濟價值。

6、滅菌處理

要獲得微生物純培養,必須避免雜菌汙染,因此對所用器材及工作場所進行消毒與滅菌。對培養基而言,更是要進行嚴格的滅菌。對培養基一般採取高壓蒸汽滅菌,一般培養基用1.

05kg/cm2,121.3℃條件下維持15-30min可達到滅菌目的。

在配製培養基過程中,泡沫的存在對滅菌處理極不利,因為泡沫中的空氣形成隔熱層,使泡沫中微生物難以被殺死。因而有時需要在培養基中加入消泡沫劑以減少泡沫的產生,或適當提高滅菌溫度。

3樓:北京索萊寶科技****

lb培養基,是微生物學實驗中最常用的培養基,用於培養大腸桿菌等細菌,其分為液態或是加入瓊脂製成的固態培養基。加入抗生素的 lb 培養基可用於篩選以大腸桿菌為宿主的克隆。

成分胰蛋白腖(tryptone) 10g

酵母提取物(yeast extract) 5g

氯化鈉(nacl) 10g

固體培養基另加 瓊脂粉 15-20g

加雙蒸水至1000ml, 用5mol/l naoh(約0.2ml)調ph至7.2,121℃滅菌30min

配製方法

(1)稱量 分別稱取所需量的胰化蛋白腖、酵母提取物和nacl,置於燒杯中。

(2)溶化 加入所需水量2/3的蒸餾水於燒杯中,用玻棒攪拌,使藥品全部溶化。

(3)調ph 用1mol/l naoh溶液調ph至7.2。

(4)定容 將溶液倒入量筒中,加水至所需體積。

(5)加瓊脂 加入所需量瓊脂,加熱融化,補足失水。

(6)分裝、加塞、包紮。

(7)高壓蒸汽滅菌100pa滅菌20min。

4樓:七零后王大姐

誒,我去培養基需要很精確的配置。

5樓:痕水月

主要就是用一些糖類物質,然後還有一些蛋白質的物質的,然後配置出來就可以了。

6樓:l楚輕狂

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