1樓:網友
電泳緩衝液一般是1×tae或者。
tae一般配製成50×的儲存液。
組分濃度2m tris-醋酸,100mm edta配製方法:
1。稱量tris 242g,na2edta·2h2o 於1l燒杯中;
2。向燒杯中加入約800ml去離子水,充分攪拌均勻;
3。加入的冰醋酸,充分溶解;
4。加去離子水定容至1l後,室溫儲存。
tbe一般配製成10×的儲存液。
組分濃度890mm tris-硼酸,20mm edta配製方法:
1。稱量tris 108g,na2edta·2h2o ,硼酸 55g於1l燒杯中;
2。向燒杯中加入約800ml去離子水,充分攪拌均勻;
3。加去離子水定容至1l後,室溫儲存。
在瓊脂糖凝膠電泳實驗中所用到的瓊脂糖有什麼作用
2樓:北京索萊寶科技****
瓊脂糖是線性的多聚物,基本結構是1,3連結的β-d-半乳糖和1,4連結的3,6-內醚-l-半乳糖交替連線起來的長鏈 。瓊脂果膠是由許多更小的分子組成的異質混合物。瓊脂糖在水中一般加熱到90℃以上溶解,溫度下降到35-40℃時形成良好的半固體狀的凝膠,這是它具有多種用途的主要特徵和基礎。
瓊脂糖凝膠效能通常用凝膠強度表示。強度越高,凝膠效能越好。
瓊脂糖在水中一般加熱到90℃以上溶解,溫度下降到35-40℃時形成良好的半固體狀的凝膠,這是它具有多種用途的主要特徵和基礎。瓊脂糖凝膠效能通常用凝膠強度表示。強度越高,凝膠效能越好。
質量較好的瓊脂糖強度通常在1200克/cm2以上(1%膠濃度)。
瓊脂糖的凝膠性是由存在的氫鍵所致,凡是能破壞氫鍵的因素都能導致凝膠性的破壞。瓊脂糖具有親水性,並幾乎完全不存在帶電基團,對敏感的生物大分子極少引起變性和吸附,是理想的惰性載體。在瓊脂糖製備過程中需要把瓊脂果膠儘量去除,否則瓊脂糖有可能存在極微量硫酸根和丙酮酸取代電離基團,就會造成電內滲(eeo),電內滲對質點的移動產生影響。
瓊脂糖凝膠電泳沒有跑出條帶是怎麼回事用1%的瓊脂糖
3樓:匿名使用者
瓊脂糖凝膠電泳沒有跑出條帶是怎麼回事用1%的瓊脂糖1.首先要排除瓊脂糖凝膠配製的是否正確,如果齒孔不規則或殘餘凝膠顆粒則會使條帶不規則;
2.檢查電泳槽的電極是否出現移位、歪斜;
3.考慮更換電泳緩衝液;
4.電壓不要太高,否則凝膠會受熱。
此外,跑出漂亮的瓊脂糖電泳**我有2個經驗供參考:
1.瓊脂糖凝膠配好後在在槽子裡先空跑十幾分鍾然後斷電放置備用;
2.老式槽子放凝膠位置的下方有一水箱,往裡充入涼水,電泳時可降低凝膠的溫度放置dna條帶變形。
核酸的瓊脂糖凝膠電泳為什麼要用電泳緩衝液配製凝膠
4樓:網友
主要的原因是保持瓊脂凝膠和周圍的緩衝體系保持相同的ph值,當然這種ph值是前人優化過的,最有利於核酸分離和穩定的ph條件;如果凝膠和緩衝體系的ph存在較大的差異,勢必會影響核酸的分離效果。
5樓:***
保持合適的ph和離子強度,使電泳順利進行。如果配膠的緩衝液與電泳緩衝液不同,電泳時凝膠可能會變形。
6樓:佐為的天
1.含氮鹼基有一定影響。
2.電流過大時凝膠溶液溫度公升高,溶液蒸發,會造成電泳異常。
瓊脂糖凝膠怎麼配製?
7樓:鶴髮童顏
把瓊脂糖,即幾乎不含硫酸根的主要成分為多糖的瓊脂,溶於熱水,倒入玻璃杯中,冷卻製成的凝膠。融化後在37°c下可維持液態數小時,30°c時凝固成膠。即完成瓊脂糖凝膠的配置。
製成的小顆粒用於凝膠過濾,適於用sephadex不能分級分離的大分子的凝膠過濾,若使用5%以下濃度的凝膠,也能夠分級分離細胞顆粒、病毒等。利用其吸附性小的特點,有時用它代替瓊脂、以作為免疫電泳或凝膠內沉降反應的支援物。
8樓:網友
你好,抄。
瓊脂糖凝膠的配製襲是分子實驗室比bai較基本的操du作,因此正zhi
確地操作對整個實dao驗來講很有必要,大體流程如下:稱量、熔膠、倒膠、拔梳。
1.稱量 我們通常所說的的膠都是指的質量體積分數,即所稱取的瓊脂糖粉的質量(g)比所加的tbe緩衝液的體積(ml)即膠的濃度。緩衝液的體積根據膠板的大小而定。
如小膠板的膠需要瓊脂粉,tbe13ml。
2.熔膠 將所稱量的瓊脂粉與tbe在錐形瓶中混合,在微波爐內反覆加熱2~3次至瓊脂粉溶解並無氣泡。
3.倒膠 乾淨的膠槽內擺好梳子,往膠內滴加1ul左右核酸染料,混勻,待冷卻至不燙手,輕輕倒入膠板內。
4.拔梳。待大約20min後,輕輕拔掉梳子(若不好拔,可以滴加適量的tbe緩衝液)。
9樓:網友
有不同的濃度。
1%、等。一般用1%濃度的凝膠用來分離幾百到幾千bp大小的dna。
稱好瓊內。脂糖後,放容入tae或tbe buffer中,用微波爐加熱溶解,冷卻至55 ℃時,加入少量eb或替代物,倒入模中,冷卻凝固。
10樓:天蠍的心馳神往
配製2%的瓊脂糖凝膠:
1.準確稱量7g瓊脂糖乾粉,加入350ml tae緩衝液,微波爐加熱溶解。
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