sds page中分離膠的濃度指的是什麼的濃度?

2025-07-13 00:15:12 字數 1266 閱讀 3510

1樓:乾萊肥半梅

為什麼又問一遍呢?

是(聚)丙烯醯胺濃度啊,當然其他物質比例也要作相應的調整,聚丙烯醯胺膠本身的分離能力是由聚丙烯醯胺提供的,正如瓊脂糖凝膠的分離能力是由瓊脂糖提供的一樣。

sds-page的濃縮膠的分離膠的濃度分別是6.8 和8.8,為什麼

2樓:匿名使用者

因為需要一定的濃度才能進行反應,才有結果。

western-blot中分離膠的濃度怎麼選擇

3樓:匿名使用者

western blot中分離膠濃度的選擇取決於目的蛋白分子量 不同的分離膠濃度對不同的目的蛋白分子量的解像度不一樣,比如15%的分離膠更適合45kda的分目的蛋白,而10%的分離膠更適合70kda的目的蛋白而因為western blot的膜應該是完全覆蓋sds page的凝膠,所以不用太擔心條帶在凝膠上位置偏上活偏下 所以western blot中分離膠濃度的選擇取決於目的蛋白分子量。

如果以溴酚藍跑到膠的底部為準,26kd在10%的由下往上1/4的地方,而15%就在由下往上大約1/2(不太確定)的地方,對於分子量比較小的蛋白,當然是膠的濃度越大,分離效果越好。但是你必須考慮到,膠的孔徑一旦小於蛋白-sds複合體的直徑,分子量大於這個蛋白的所有蛋白仍然不能有好的分離效果。如果孔徑太大,所有蛋白都跑得那麼快,也是分不開的。

所以,關鍵是看這個分子量附近的蛋白,比如±5kd以內的所有蛋白,在不同濃度的膠中的速度差要儘可能達到最大,假設是對數正態分佈,那麼方差要足夠大,才會有較好的分離效果。另一方面,蛋白跑的路程越大,也越能和附近的蛋白分開。

我的建議是溴酚藍跑到底,而目標蛋白正好在整塊膠的1/2的地方,分離的效果時最好的。

怎樣根據蛋白質大小確定sds-page電泳分離膠的濃度

4樓:匿名使用者

按的是你丙烯醯胺和雙丙烯醯胺的總質量 與 膠總體積 的質量體積比(m/v)

首先你要將上述藥品粉末按照19:1或29:1的比例用水配置成母液(一般為30%,也是m/v)

而10%,12%,16%你自然也就知道應該用多少的母液去配製了。相信如何配膠你是知道的。

10% sdspage膠 什麼意思

5樓:網友

10%是指丙烯醯胺在sds-page凝膠(分離膠)中的百分比。

調整配膠時的加入丙烯醯胺的體積,就可以調整凝膠的濃度,配製出適合檢測不同分子量蛋白樣品的凝膠。

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