1樓:網友
現在的2d電泳方法沒變,就是蛋白質上樣前有了很多新發展,digea等等。
反正覺得2d電泳不是唯一的蛋白質分離方式,有高階的質譜儀器就直接能測。
二維聚丙烯醯胺凝膠電泳的發展歷史
2樓:小鋒
根據一維等電聚焦方式的不同,可將二維聚丙烯醯胺凝膠電泳分為3種系統。第一種系統是在聚丙烯醯胺管膠中進行,兩性電解質在外加電場作用下形成梯度,這一系統被稱為iso-dalt系統。 iso-dalt系統的主要缺點是ph梯度不穩定(如陰極漂移)、重複性差、上樣量低,固不利於不同實驗室之間進行圖譜的比較和資料釋出。
但通過優化各種電泳條件,仍可得到相對穩定的圖譜。針對鹼性蛋白質難以分離的問題,後公尺引入了非平衡dh梯度電泳,該體系主要在鹼性蛋白質的分離上提高了效能,但重複性仍比較差。如果在第一維方向上的電泳使用丙烯醯胺和不同ph的丙烯醯胺的衍生物共聚,從而建立起具有ph梯度的固相化膠條,這樣的系統稱為固相ph梯度等電聚焦系統。
ipg—ief已成為目前通用的一維等電聚焦方式。
ipg膠條的使用大大提高了二維聚丙烯醯胺凝膠電泳的重複性和解像度,從而使二維聚丙烯醯胺凝膠電泳資料的釋出和圖譜的比較成為可能。在較好的狀態下,傳統等電聚焦技術和變性(採用十二烷基硫酸鈉)聚丙烯醯胺凝膠電泳在20cm左右長度的凝膠中可在各自方向上分辨出100個不同的蛋白質條帶,因此,理論上二維聚丙烯醯胺凝膠電泳分辨能力可達到l0000個點。目前已有實驗室在30cm×40cm的大膠上獲得這一分離效果;考慮到大多數實驗室並不具備執行這種大膠所需要的條件,普通情況下的凝膠(20 cm×20 cm) 分辨到3000個點己是相當不錯,而儀酵母菌的全蛋白質組就有6000多個蛋白質,已完成的人類基因組估計有3萬~5萬個基因,可能表達的蛋白質達數十萬,這些將對2一de技術的分離能力提出挑戰。
聚丙烯醯胺凝膠電泳分離血清蛋白質
3樓:匿名使用者
電泳法是基於蛋白質具有不同的分子量、帶有不同的電荷、不同的等電點等特點,將不同蛋白質加以分離,常見的有聚丙烯醯胺凝膠電泳、sds—page、等電聚焦等,就看樓主你具體選擇哪種電泳。不過常見的是基於蛋白分子量的不同,加以分離,蛋白分子量大的話,電泳的時候移動得慢,反之則快,經過一段時間的電泳,分子量不同的蛋白質就分成不同的條帶了。
瓊脂糖凝膠電泳鑑定基因組dna的意義
4樓:網友
鑑定基因組時候有降解,即完整性(有的話表現為拖帶);是否有rna汙染(有的話可以看出,沒空給你放**了);是否有蛋白質殘留(加樣孔);是否和分光光度計測值相符(即測值是否準確)。
電泳是非常有必要的,對評價你的gonomedna有很大的意義,
請教,1 瓊脂糖凝膠電泳中所需的溶液,以及配製
電泳緩衝液一般是 tae或者。tae一般配製成 的儲存液。組分濃度m tris 醋酸,mm edta配製方法 。稱量tris g,naedta ho 於l燒杯中 。向燒杯中加入約ml去離子水,充分攪拌均勻 。加入的冰醋酸,充分溶解 。加去離子水定容至l後,室溫儲存。tbe一般配製成 的儲存液。組分濃...
vb 二維陣列宣告問題,VB 二維陣列宣告問題
vb規定,dim 陣列必須要求常數表示式,否則會出錯。但此問題可以這樣解決 dim m1 as integer,m2 as integerdim a as integer dim b as integer dim c as integer m1 2 這裡可以改為m1,m2從資料庫中讀取的數值m2 2...
c語言輸入整型二維陣列a,計算該二維陣列中的最
include void main int a 3 4 max,maxi 0,maxj 0,i,j printf 請輸入 n for i 0 i 3 i for j 0 j 4 j scanf d a i j max a 0 0 for i 0 i 3 i for j 0 j 4 j if max中...