質粒提取時為什麼用異丙醇提取dna

為什麼提取質粒時加入異丙醇出現了白色絮狀沉澱？

1樓：網友

首先要知道，質粒是共價，閉合，環狀的dna（cccdna）。以常用的鹼裂解法為例：當菌體在naoh和sds溶液中裂解時，蛋白質與dna發生變性，當加入中和液後，

2樓：網友

異丙醇能使蛋白質變性，出現的絮狀沉澱應為蛋白質。

3樓：一縷清風

首先：你要知道是從什麼菌種裡面提取質粒包括菌種一般常識，其次：是用什麼方法提取質粒包括原理，再次：知道為什麼要加入異丙醇，起的作用是什麼？

最後：才可能知道白色絮狀沉澱是什麼。

加異丙醇是用來沉澱質粒的，出現白色絮狀沉澱，說明質粒提取純度不夠，也就是有蛋白質等汙染，蛋白質等雜質和質粒一起沉澱了，能看到，說明汙染已經特別嚴重了，呵呵，可以用酚氯仿或者酒精沉澱再除雜一次，也可能是你得方法不好，或者換個方法試試，也可能是你操作的問題比如樣品用量大超過了該方法的提取極限等。

分析清楚後再做祝你好運。

提dna或質粒時，為什麼要用70%的酒精來洗

4樓：雲長天雨

乙醇的優點是可以任意比和水相混溶，乙醇與核酸不會起任何化學反應，對dna很安全，因此是理想的沉澱劑。 dna溶液是dna以水合狀態穩定存在，當加入乙醇時，乙醇會奪去dna周圍的水分子，使dna失水而易於聚合。一般實驗中，是加2倍體積的無水乙醇與dna相混合，其乙醇的最終含量佔67％左右。

因而也可改用95％乙醇來替代無水乙醇（因為無水乙醇的**遠遠比95％乙醇昂貴）。但是加95％的乙醇使總體積增大，而dna在溶液中有一定程度的溶解，因而dna損失也增大，尤其用多次乙醇沉澱時，就會影響收得率。折中的做法是初次沉澱dna時可用95％乙醇代替無水乙酵，最後的沉澱步驟要使用無水乙醇。

也可以用倍體積的異丙醇選擇性沉澱dna。一般在室溫下放置15－30分鐘即可。

質粒dna的小量提取時dna的量太少是為啥

5樓：匿名使用者

大提質粒和小提質粒的基本原理是一樣的，都是通過一定的方法（如加鹼裂解）使在細菌內大量擴增的質粒釋放出來，然後經過去蛋白去rna等一系列步驟純化dna，最終將dna提取出來。區別：

1.大提用於大量菌液的提取，100ml-500ml 均可，而小提用的菌液量很少，一般。

2.一般試劑盒中大提比小提多了溶菌酶、異丙醇（**沉澱核酸）、含一定量peg的氯化物（**質粒dna）及乙酸銨等，其作用及目的都是有利於細菌的裂解和質粒的純化，所以大提的產物比小提的量多很多，而且純度很高。

3.小提一般用於質粒鑑定和對純度要求不是很高的實驗，大提用於質粒的大量提取和轉染等純度要求很高的實驗。

dna提取中加入異丙醇為什麼變色

6樓：南霧嶺後

變渾濁吧，變成白色沉澱啦。是dna 和少量蛋白質析出。

請問在提質粒的時候用異丙醇沉澱,為什麼是室溫呢?

7樓：網友

分離得比較好。但是在常溫下提取破壞要少很多。