提取基因組RNA時,怎樣避免產物降解?

2025-07-15 01:05:18 字數 2640 閱讀 2724

1樓:玫瑰_薄荷

操作時保持低溫,速度儘量快,周圍環境中儘量不要有rna酶(少說話,有條件的話噴灑rna酶抑制劑)

2樓:北京華越洋生物

外源rna酶清除劑,可以搞定。噴灑檯面,浸泡處理耗材,去除外源rna酶清除劑,避免其降解。

3樓:梁廣旺

具體操作注意都能夠搜到,我只想說一下我的經驗,第一步很重要,剩下的只要細心一下都不會出現問題。

如何防止核酸降解基因組dna?

4樓:匿名使用者

1、取培養至對數生長後期的含pbs質粒的細菌培養液250ml,4℃下5000g離心15分鐘,棄上清,將離心管倒置使上清液全部流盡。

2、將細菌沉澱重新懸浮於50ml用冰預冷的ste中(此步可省略)。

3、同步驟1方法離心以收集細菌細胞。

4、將細菌沉澱物重新懸浮於5ml溶液i中,充分懸浮菌體細胞。

5、加入12ml新配製的溶液ii, 蓋緊瓶蓋,緩緩地顛倒離心管數次,以充分混勻內容物,冰浴10分鐘。

6、加9ml用冰預冷的溶液iii, 搖動離心管數次以混勻內容物,冰上放置15分鐘,此時應形成白色絮狀沉澱。

下5000g離心15分鐘。

8、取上清液,加入50ml rna酶a(10mg/ml), 37℃水浴20分鐘。

9、加入等體積的飽和酚/氯仿,振盪混勻,4℃下12000g離心10分鐘。

10、取上層水相, 加入等體積氯仿,振盪混勻,4℃下12000g離心10分鐘。

11、取上層水相,加入1/5體積的4mol/l nacl和10% peg(分子量6000), 冰上放置60分鐘。

下12000g離心15分鐘, 沉澱用數ml 70%冰冷乙醇洗滌,4℃下12000g離心5分鐘。

13、真空抽乾沉澱,溶於500ml te或水中。

注意] 1. 提取過程中應儘量保持低溫。

2. 加入溶液ii和溶液iii後操作應混和,切忌劇烈振盪。

3. 由於rna酶a中常存在有dna酶,利用rna酶耐熱的特性,使用時應先對該酶液進行熱處理(80℃ 1小時),使dna酶失活。

rna提取中如何防止基因組的汙染?

5樓:***

提取後用無rna酶的dna酶處理,即可消除基因組汙染。

6樓:網友

提取前先使用rnase清除劑,提取後使用dnase。

7樓:北京華越洋生物

北京華越洋的rna提取試劑盒,離心吸附柱,矽膠膜上消化dna汙染。提取所得rna可直接做dna汙染敏感的。螢光定量pcr

如何防止核酸降解基因組dna?

8樓:網友

rna酶,很便宜的。在提取dna的時候就新增。如果用試劑盒提取的話,裡面就有此酶的。

求生物高手指點,做dna、rna提取實驗時提取的基因組dna有降解,如何解決?

9樓:阿伊宴曉

在實驗過程中注意加入edta,因為它是dna的酶抑制劑,dna在變性後,可以防止dna被降解。在加入鹼性溶液破碎細胞後,搖動離心管一定要溫和,不能振盪,儘可能上下顛倒混。並且要注意時間間隔做下一步不要太長,這時候也可能破壞了dna,使其降解,所以一定要把握好時間。

10樓:洛瀾漪

提取的是什麼的dna啊,動物植物還是細菌。實驗過程小心dna酶的汙染,edta注意不能過期,如果可以的話儘量採用液氮研磨提取,如果沒有液氮也要保持低溫,沉澱重懸的時候動作一定要注意輕柔,否則也會破壞dna的完整性,儘量減少蛋白質的汙染,否則會影響dna的進一步操作的。個人提取dna時候的一點經驗,希望對你有幫助。

11樓:網友

不要暴露在空氣中太長時間,dna rna 的提取不要同時進行 因為提取rna的時候用到了dna酶。

rna 提取28s降解是什麼原因

12樓:獨特的

是不是樣品不新鮮了。rna提取對樣品要求很高,必須現採現做,或者在樣品保護液裡,低溫儲存。

而且提取的操作期間,最好也要保持低溫,包括冷凍離心等等。

如何防止提取過程中rna的降解?

13樓:魚骨頭愛游泳

因為自然界(實驗室)普遍存在rna酶,提取時需要注意幾點:

1、所用試劑、耗材需用depc水浸泡然後高壓滅菌2、實驗時戴口罩,主要是防止呼吸、說話時rna酶進入試劑中3、實驗臺保持清潔、降低環境rna酶。

4、rna提取後,放入-80攝氏度儲存,防止降解。

為什麼提取rna時rna容易降解,提取dna時rn

14樓:翰林學庫

「提取dna比提取rna容易,是因為dna容易被降解」錯誤,正確的說法是「提取dna比提取rna容易,是因為rna容易被降解」.

因為環境中,充斥著各種rna酶,很容易把rna降解掉。在rna提取實驗中,用到的各種試劑和器皿一定要確保除去rna酶,甚至不能把試劑暴露在空氣中。操作不嚴格的話,可能得到的是rna降解產物。

dna酶的分佈就不如rna酶,提取dna時的實驗條件相對寬鬆得多。

水稻基因組計劃的水稻基因組測序,水稻基因組計劃的意義價值

4 憶江南 白居易 水稻基因組計劃的意義價值 任何一個生物的全基因組序列都蘊藏著這一生物的起源 進化 發育 生理等重要資訊。水稻是全球半數以上人口賴以生存的糧食作物,對於人類生活 糧食安全具有至關重要的意義。研究表明,水稻共有12條染色體,它們記錄著與水稻的高產優質 美味香色以及與生長期 抗病抗蟲 ...

什麼是基因組學,什麼是基因組?什麼是基因組學

研究基因 組的結構 功能及表達產物的學科。基因組的產物不僅是蛋白質,還有許多複雜功能的rna。包括三個不同的亞領域,即結構基因組學 功能基因組學和比較基因組學。研究生物基因組和如何利用基因的一門學問。用於概括涉及基因作圖 測序和整個基因組功能分析的遺傳學分支。該學科提供基因組資訊以及相關資料系統利用...

什麼是功能基因組學,功能基因組學的基本研究思路與基本方法是啥,是什麼

基因組 genome 是 指一個細胞或者生物體所攜帶的一套完整的單倍體dna 部分病毒是rna 序列。基因組學 genomics 則是指對所有基因進行基因組作圖 核苷酸序列分析 基因定位和基因功能分析的一門學科。功能基因組學 functuional genomics 又被稱為後基因組學 post g...